[发明专利]一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌的制备方法及应用，微生物技术领域。本发明的贝莱斯芽孢杆菌NF002能够高效拮抗禾谷镰刀菌，同时能够有效抑制禾谷镰刀菌DON毒素的产生并且能够降解麦粒中DON毒素，贝莱斯芽孢杆菌NF002可作为小麦赤霉病的生物防治材料，无论开发新的生物农药或者新的生物防治菌剂方面，该菌都具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌及制备方法和应用。

背景技术

小麦赤霉病是小麦的主要病害之一，在全世界普遍发生。小麦赤霉病从小麦幼苗到抽穗时期均可感染，主要引起苗枯、茎基腐、秆腐和穗腐，其中穗腐的危害最为严重。我国大部分地区的小麦赤霉病是由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引起的。禾谷镰刀菌引起的麦类赤霉病不仅能够严重影响小麦的产量，而且会影响小麦的品质，在感染的谷粒中会产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalanol，DON)和玉米赤霉烯酮(Zearalenon)等毒素。其中DON毒素具有化学性质稳定，受热不分解的特性。DON毒素能够引起人畜中毒，主要有恶心、呕吐、眩晕、发烧、头痛、手足发麻、全身乏力、腹泻等急性中毒症状，严重者可出现呼吸、脉搏、体温、血压的波动，以及出血、流产、甚至导致死亡。因此严重影响以小麦为原材料的食品质量，危害人和动物的健康。

目前，大多是使用化学药剂对小麦赤霉病进行防治，但是化学药剂会对人类的身体健康和环境造成严重的危害。因此，微生物防治凭借其无污染、无公害、无残留，同时不易产生抗药性等优点成为当前研究的热点。目前的研究所涉及的微生物种类有很多，其中芽孢杆菌具有其明显优势：其一，芽孢杆菌具有广谱抑菌性；其二，芽孢杆菌具有分布广泛、抗逆性强等特性，有利于开发、加工、储藏和使用，具有广阔的研究前景和利用价值。现有的大量研究结果表明芽孢杆菌是通过拮抗作用、竟争作用、分泌抗菌物质等途径抑制病原菌生长，同时诱导植物获得系统抗性以达到抑制植物病原菌的效果。

本发明提供一株菌株来源于湖北钟祥稻麦轮作区小麦麦粒的天然生防菌贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）NF002，该菌株能够防治麦类赤霉病，抑制禾谷镰刀菌孢子萌发、菌丝生长和DON毒素合成，并且能够降解麦粒中的DON毒素。本发明还提供了该菌株的发酵培养和喷雾制剂的制备和应用方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一株贝莱斯芽孢杆菌及其应用，本发明的贝莱斯芽孢杆菌NF002能够高效拮抗禾谷镰刀菌，同时能够有效抑制禾谷镰刀菌DON毒素的产生并且能够降解麦粒中DON毒素，贝莱斯芽孢杆菌NF002作为小麦赤霉病的生物防治材料，无论开发新的生物农药或者新的生物防治菌剂方面，该菌都具有良好的应用前景。

经过发明人大量筛选和试验，最终获得了一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌，所述的贝莱斯芽孢杆菌为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）NF002，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO:M 20191000, 保藏日期：2019年12月03日，地址中国 武汉 武汉大学。

一株如上所述的高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌的应用，该菌株NF002可以抑制禾谷镰刀菌的菌丝生长、孢子的萌发、抑制禾谷镰刀菌DON毒素的合成和降解麦粒中的DON毒素，用于小麦赤霉病的防治。

如上所述的一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌的应用，防治小麦赤霉病时可在小麦扬花初期喷施所述的贝莱斯芽孢杆菌。

一株如上所述的一株高效拮抗禾谷镰刀菌的贝莱斯芽孢杆菌的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）将筛选得到的NF002单菌落从平板上挑取，接入灭菌的LB液体培养基中，在28℃ 、180 r/min的条件下，培养24 h，进行活化；