[发明专利]一种病理组织切片的制作方法

说明书

本发明公开了一种病理组织切片的制作方法，包括以下步骤：活体取材、组织固定、组织洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烘片、脱蜡、渗水、水洗、染色等辅助操作，提高了组织切片的制作质量及后期病理实验结果的准确性。如在浸蜡、包埋步骤中：先将石蜡块在50‑60℃温度下熬制2‑3h，能极大地避免石蜡固定后有气泡的问题，提高组织切片的成品率；通过将切片机改进为自动传输组织切片的方式，取消了用镊子和毛笔类的工具将切片组织进行转送的步骤，减少组织切片的污染，提高后期实验准确度，同时使得切片机可以连续切片，提高整体制作的效率。

技术领域

本发明涉及病理学技术领域，尤其涉及一种病理组织切片的制作方法。

背景技术

病理切片是病理标本的一种，病理切片是取一定大小的实验动物或病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精－伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变，病变的发生发展过程，最后作出病理诊断。病理切片是通过观察细胞等级的病理组织结构，而病理组织制作过程中步骤繁多，且切片厚度极小，因此对组织的制作及切片的制作质量要求高。目前病理组织制作过程中主要存在的问题是通过蜡块包埋后，蜡块中有气泡，存在较多不合格的切片，影响组织切片质量，降低了切片的成品率；另一方面，通过常规切片机切片后，操作人员用镊子和毛笔类的工具将切片组织进行转送，这种方式很容易对切片组织形成污染，影响后期实验结果，同时，该种方法需要对切片机不断地开机、停机，降低了切片的效率。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种病理组织切片的制作方法，包括以下步骤：活体取材、组织固定、组织洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烘片、脱蜡、渗水、水洗、染色等辅助操作，提高了组织切片的制作质量及后期病理实验结果的准确性，并且通过对切片机的改进，提高了病理切片切片效率和切片质量。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：一种病理组织切片的制作方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、活体取材：选取实验动物或手术切除后的病变组织，常规消毒后，得到离体组织；

b、组织固定：将离体组织完全浸泡在10％中性甲醛溶液中24h；

c、组织洗涤：用纯水将固定后组织上的甲醛溶液清洗1-2h；

d、脱水：将洗涤后的组织依次于80％乙醇1.5-2h、95％乙醇1-1.5h、100％乙醇0.5-1h中脱水处理；

e、透明：将脱水后的组织依次在二甲苯Ⅰ中浸入0.5-1h、二甲苯Ⅱ中浸入0.3-0.5h进行透明处理；

f、浸蜡、包埋：先将石蜡块在50-60℃温度下熬制2-3h，将熬制后的石蜡和透明后的组织一起放入55-60℃电热恒温箱中2-2.5h浸蜡，包埋得到病理蜡块；

g、切片：将病理蜡块通过切片机进行切片操作，切片厚度为2-4um；

所述切片机包括斜面刀座和辅助装置，所述斜面刀座顶部设有刀片，斜面刀座的斜面上设有传输装置，所述刀片底端延伸到传输装置表面，所述斜面刀座底部设有水浴盒，所述传输装置底端延伸到水浴盒的溶液中，切片后的病理组织通过传输装置直接浸入到40-45℃水浴盒中；

h、贴片、烘片

选取水浴盒中完整的组织切片在载玻片上进行贴片，切完片后放入60-65℃恒温箱中3-5h至干燥；

i、脱蜡

将干燥后的切片依次在二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ溶液中各进行0.2-0.3h的脱蜡处理；

j、渗水、水洗

将脱蜡后的切片依次于无水乙醇、95％乙醇、80％乙醇中浸泡2-3min后，用纯水水洗后放置无水滴状态；