[发明专利]一种溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒及其制备方法有效
申请号: | 202010356715.6 | 申请日: | 2020-04-29 |
公开(公告)号: | CN111665361B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
发明(设计)人: | 肖华西;杨帆;林亲录;刘高强;张琳;许东;丁玉琴;文茜;郑湘明 | 申请(专利权)人: | 中南林业科技大学;湖南工业大学 |
主分类号: | G01N33/58 | 分类号: | G01N33/58;G01N21/64;C09K11/06;C09K11/02 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人: | 王艳;宁星耀 |
地址: | 410004 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 溶酶体 标记 磁性 荧光 淀粉 纳米 颗粒 及其 制备 方法 | ||
1.一种溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将可溶性淀粉溶液加入Fe3+水溶液中,每毫摩尔Fe3+加入 0.02~0.04g可溶性淀粉,升温至80~90℃,分散均匀,得混合物溶液;搅拌条件下,将混合物溶液滴加至氨水溶液中,保持pH值为9~11,60℃下,搅拌反应,分离出固体,烘干,得平均直径为200~300nm的Fe3O4磁性淀粉纳米颗粒;
(2)将Fe3O4磁性纳米淀粉颗粒与赖氨酸静电结合,得到富含氨基的多聚氨酸淀粉纳米颗粒;
(3)将多聚氨酸淀粉纳米颗粒与异硫氰酸荧光素混合,得到异硫氰酸荧光素标记的溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)具体为:将1 mg磁性淀粉纳米颗粒分散于1mL磷酸盐缓冲液(PBS)中,摇匀,倒入0.1 mg/mL多聚赖氨酸(PLL)的PBS溶液中,在40℃、400r/min摇床震荡条件下反应2 h,反应完毕后,离心,弃去上清液,用蒸馏水多次洗涤沉淀,冷冻干燥,得到富含氨基的多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒。
3.根据权利要求2所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)具体为:将1mg富含氨基的多聚赖氨酸淀粉纳米颗粒分散于1mL的PBS缓冲液中,加入0.01~0.1mg异硫氰酸荧光素,在室温条件下,100r/min摇床振荡4 h后,加入无水乙醇,有沉淀析出,离心,弃去上清液,沉淀加水反复溶解,再一次用乙醇醇沉,重复3次,洗涤沉淀,产物为异硫氰酸荧光素标记的磁性荧光淀粉纳米颗粒。
4.根据权利要求1~3任一项所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述可溶性淀粉溶液的为质量百分浓度1~3%的可溶性淀粉水溶液,所述Fe3+水溶液的摩尔浓度为0.02~0.03mol/L。
5.根据权利要求4所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述氨水溶液为5M NH3·H2O,氨水溶液的体积与Fe3+水溶液体积比为3~5:5,所述搅拌的转速为100r/min。
6.根据权利要求5所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述磁性纳米淀粉颗粒的平均粒径为200nm。
7.根据权利要求6所述溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,每毫摩尔Fe3+加入0.03g可溶性淀粉,所述可溶性淀粉溶液的质量百分浓度为2 %的可溶性淀粉水溶液,所述Fe3+水溶液的摩尔浓度为0.03mol/L。
8.一种溶酶体标记磁性荧光淀粉纳米颗粒,其特征在于,由权利要求1~7任一项所述制备方法制备获得。
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