[发明专利]一种利用高速逆流色谱技术从忧遁草中制备三萜类化合物羽扇豆醇的方法

权利要求书

1.一种利用高速逆流色谱技术从忧遁草中制备三萜类化合物羽扇豆醇的方法，其特征在于，包含如下步骤：

提取步骤：取干燥的忧遁草全草用醇提取，得忧遁草醇提物；

萃取步骤：将忧遁草醇提物先分散于水中，然后用石油醚萃取，再经乙酸乙酯萃取，浓缩乙酸乙酯萃取部位得乙酸乙酯萃取物；

高速逆流色谱分离步骤：将乙酸乙酯萃取物采用高速逆流色谱法进行分离，得羽扇豆醇粗制品；

高速逆流色谱法中采用的溶剂由环己烷、乙酸乙酯、乙腈以及水组成；其中环己烷、乙酸乙酯、乙腈以及水的体积比为4～6:1～2:3～5:1～2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，环己烷、乙酸乙酯、乙腈以及水的体积比为5:2:4:1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，高速逆流色谱法中高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为800～1000rpm；固定相保留值为：60％～80％，流动相的流速为1～2ml/min；分离温度为20～30℃；紫外检测波长为205～235nm；进样后收集33～36min的洗脱部位，将洗脱部位浓缩干燥后即得羽扇豆醇粗制品。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，高速逆流色谱法中高速逆流色谱主机顺时针转动，转速为850rpm；固定相保留值为：75％，流动相的流速为1.5ml/min；分离温度为25℃；紫外检测波长为210nm；进样后收集33～36min的洗脱部位，将洗脱部位浓缩干燥后即得羽扇豆醇粗制品。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，提取步骤中采用体积分数为70～95％的乙醇进行加热回流提取。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，乙醇的用量为干燥的忧遁草全草的8～15倍量。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，羽扇豆醇粗制品进一步经硅胶柱层析进行精制；其中硅胶柱层析的具体方法为：

将羽扇豆醇粗制品上硅胶柱，用体积比为92～95:8～5的氯仿和甲醇组成的混合溶剂进行洗脱；洗脱液用TLC板进行点板追踪，当检测到洗脱液中出现第二个化合物时，停止洗脱；将洗脱下来的洗脱液浓缩干燥后即得羽扇豆醇纯品。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述硅胶柱层析的具体方法为：

将羽扇豆醇粗制品上硅胶柱，用体积比为93:7的氯仿和甲醇组成的混合溶剂进行洗脱；洗脱液用TLC板进行点板追踪，当检测到洗脱液中出现第二个化合物时，停止洗脱；将洗脱下来的洗脱液浓缩干燥后即得羽扇豆醇纯品。