[发明专利]一种检测动物Q热的LAMP引物及检测方法

权利要求书

1.一种检测动物Q热的LAMP荧光法扩增用的引物对，其特征在于，所述的引物对用于扩增序列为SEQ ID NO：1的核酸片段的全部或部分片段。

2.如权利要求1所述的引物对，其特征在于，所述的引物对包含有序列为SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7的引物。

3.权利要求1或权利要求2所述的引物对在制备LAMP荧光检测试剂盒中的应用。

4.一种LAMP荧光检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包含有权利要求1或权利要求2所述的引物对。

5.一种LAMP荧光法检测动物Q热的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：

1)提取待检测对象的核酸样品；

2)将恒温荧光基因检测仪接通电源进行预热，对反应参数进行设置；反应参数设置为63℃，反应时间：60min；

3)在12.5μL反应液中加入8μL水，权利要求1所述或权利要求2所述的引物对1μL，1μL聚合酶和0.5μL荧光染料，充分混合后得到反应预混液；

4)在反应管盖上加2.5μL的甘油，将2μL所述步骤1)中得到的核酸样品与所述步骤3)中得到的反应预混液充分混合，得到的反应体系放入恒温荧光基因检测仪检测荧光信号；

5)根据DHelix1610检测仪器中的阳性判定方法，可以按扩增曲线来判定，有明显扩增曲线，且上游引物和下游引物扩增的曲线相对荧光值大于1500mV判定为阳性，无明显扩增曲线且相对荧光值小于1500mV的判定为阴性。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的上游引物和下游引物的使用浓度为1～50μM；优选为10μM；

所述的探针的浓度为1～50μM；优选为10μM。