[发明专利]一种锌转运体8胰岛自身抗体的电化学发光检测试剂盒在审
申请号: | 202010362106.1 | 申请日: | 2020-04-30 |
公开(公告)号: | CN111579791A | 公开(公告)日: | 2020-08-25 |
发明(设计)人: | 顾愹;陈恒;余金波;徐宽枫;杨涛 | 申请(专利权)人: | 江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院) |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N21/76 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 黄欣 |
地址: | 210029 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 转运 胰岛 自身抗体 电化学 发光 检测 试剂盒 | ||
1.一种锌转运体8胰岛自身抗体的电化学发光检测试剂盒,包括:标记有生物素聚乙二醇活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白、标记有硫代钌衍生物活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白、链霉亲和素石墨烯平板和信号激发液;
所述重组ZnT8 胰岛抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括:pH 7.2~7.4的磷酸盐缓冲液、牛血清白蛋白。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述标记有生物素聚乙二醇活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白是将重组ZnT8 胰岛抗原蛋白与生物素聚乙二醇活性酯混合,避光孵育后经纯化得到。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述标记有硫代钌衍生物活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白是将重组ZnT8 胰岛抗原蛋白分别与硫代钌衍生物活性酯混合,避光孵育后经纯化得到。
5.利用权利要求1所述的试剂盒检测样本中锌转运体8胰岛自身抗体的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1,将抗原缓冲液加至待测血清样本中,孵育,得到抗原-抗体复合物;
步骤2,用封闭液对链霉亲和素石墨烯平板进行封闭处理;
步骤3,将抗原-抗体复合物加至封闭后的链霉亲和素石墨烯平板上,然后加入信号激发液,通过MSD电化学发光仪检测硫代钌衍生物活性酯的发光信号,判断待测血清样本中是否存在目标抗体以及目标抗体的含量;
所述抗原缓冲液是将标记有生物素聚乙二醇活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白和标记有硫代钌衍生物活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白加至抗原稀释液中得到,所述抗原稀释液为5%牛血清蛋白的磷酸盐缓冲液。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述抗原缓冲液中标记有生物素聚乙二醇活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白和标记有硫代钌衍生物活性酯的重组ZnT8 胰岛抗原蛋白的浓度比为:25~6400ng/mL:25~6400ng/mL。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述封闭液为含3%牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液。
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