[发明专利]一种中和EB病毒的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明首次公开了一种EB病毒的抗体，由轻链和重链组成，所述重链的重链可变区中具有3个互补区CDR1、CDR2和CDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示，所述轻链的轻链可变区中具有3个互补区CDR1’、CDR2’和CDR3’，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、AAS、SEQ ID NO.5所示。该抗体能够阻断EBV感染上皮细胞和B细胞，在上皮细胞中的IC50为120ng/ml,在B细胞中的IC50为211ng/ml，而对埃博拉病毒感染无中和效果，说明该抗体具有很高的特异中和EBV感染的能力。

技术领域

本发明涉及抗体技术领域，更具体地，涉及一种中和EB病毒的IgG抗体及其应用。

背景技术

EB病毒最早于1964年由Epstein和Barr从Burkitt淋巴瘤细胞中成功培养并建株。EBV 属于γ亚型疱疹病毒，是首个被发现的人类致癌病毒。EBV在人群中的感染非常普遍，据报 道全球约有95％以上的成年人携带有EBV。在儿童和青少年中，EBV感染多造成传染性单核 细胞增多症。EBV的潜伏感染与人类多种淋巴肿瘤和上皮肿瘤发生有关，如霍奇金淋巴瘤、 伯基特淋巴瘤及NK/T细胞淋巴瘤等，上皮肿瘤包括鼻咽癌和大约10％的胃癌等。而对于器 官移植病人以及艾滋病患者等免疫抑制病人来说，罹患EBV相关肿瘤的概率大大增加。据统 计，全球每年新增约200000例EBV相关的肿瘤病例,美国NIH已于2016年正式将EBV列 入第14版致癌物名录。

目前针对EB病毒尚无有效的疫苗，由EBV感染引起的疾病也缺乏特异的治疗手段。传 染性单核细胞增多症的治疗大多应用抗病毒药物如阿昔洛韦等，虽然可一定程度上缓解症状， 但并不能消除B淋巴细胞内及咽喉部上皮的EB病毒。EBV相关肿瘤的治疗主要为化疗和放 疗，但对于复发或转移的患者来说，疗效较差。

单克隆抗体可大量生产，其与抗原结合的高亲和性和高特异性，大大减少了临床应用时 的不良反应。同时可以对抗体分子进行改造以增加其抗病毒效力。抗体以其特异性和使用的 灵活性成为感染性疾病治疗中非常有前景的手段。而至今仍未有针对EBV囊膜糖蛋白的人源 单克隆抗体上市。因此开发抗EBV的人源单克隆抗体，将为EBV感染相关疾病提供更有效 的预防和治疗手段。

发明内容

本发明第一个方面的目的，在于利用EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)膜蛋白gH/gL(glycoprotein H，glycoprotein L,gH/gL)作为钓饵，筛选抗体生成的记忆B细胞，得到可 同gH/gL蛋白特异结合的单克隆抗体。通过EB病毒感染细胞模型，筛选得到了具有中和活 性的单克隆抗体。

本发明第二个方面的目的，在于提供编码本发明第一个方面所述抗体的核苷酸序列。

本发明第三个方面的目的，在于提供含有本发明第二个方面所述的核苷酸序列的转基因 细胞系。

本发明第四个方面的目的，在于提供一种治疗与EB病毒相关疾病的药物，所述药物的 活性成分为本发明第一个方面所述的抗体。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供一种中和EB病毒的抗体，由轻链和重链组成，所述重链的 重链可变区中具有3个互补区CDR1、CDR2和CDR3，其中，CDR1的氨基酸序列为GFTFSYYP(SEQ ID NO.1)，CDR2的氨基酸序列为MSFDGTSD(SEQ ID NO.2)，CDR3的氨基酸序列 为ARGGWKWPGGAFDV(SEQ ID NO.3)；所述轻链的轻链可变区中具有3个互补区CDR1’、 CDR2’和CDR3’，其中，CDR1’的氨基酸序列为QAIRNN(SEQ ID NO.4)，CDR2’的氨 基酸序列为AAS，CDR3’的氨基酸序列为LQHSTYPWT(SEQ ID NO.5)。

根据本发明第一个方面所述的抗体，所述抗体的重链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。