[发明专利]高效液相色谱法测定L-缬氨酸原料中其他氨基酸的方法

权利要求书

1.高效液相色谱法测定L-缬氨酸原料中其他氨基酸的方法，所述的其他氨基酸为L-正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备对照品溶液：称取L-正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸分别置于不同量瓶中，用流动相溶解、定容、摇匀；

（2）制备供试品溶液：称取L-缬氨酸原料用流动相溶解、定容、摇匀；

（3）高效液相色谱法测定：分别取对照品溶液注入高效液相色谱仪，记录保留时间和峰面积；取供试品溶液注入高效液相色谱仪，供试品色谱图中出峰时间及峰形与对照品溶液色谱图中L-正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸的出峰时间及峰形进行比对，判定供试品溶液是否含有L-正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸，将供试品色谱图中L-正缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸峰面积与对照溶液相应氨基酸峰面积对比，计算出L-缬氨酸原料中各氨基酸的含量；

色谱条件如下：

色谱柱: 氨丙基键合硅胶色谱柱，250mm×4.6mm，5µm；

流动相：体积比为72：28的乙腈与磷酸盐缓冲液的混合溶液，其中磷酸盐缓冲液浓度为15mmol/L，加入0.2%的三乙胺，用磷酸调节pH为6.2；

流速：1.0ml/min；

柱温：25℃；

进样体积：20µl；

检测波长：UV210nm。