[发明专利]补肾蛋白或其编码基因在保健酒补肾功能评价中的应用

说明书

本发明涉及补肾蛋白或其编码基因在保健酒补肾功能评价中的应用。本发明通过基因芯片筛选，以ACTH为阳性参照基因，得到5个和中医补肾功能相关的蛋白及其编码基因，分别为Cyr61、Zfp568、Plk3、Gadd45α和Ptgs2。这5种蛋白的编码基因PCR扩增特异性较好，重复性也较好。本发明使用ACTH做为阳性参照基因，提高了补肾基因筛选的精准度，筛选得到5个和补肾功能相关的蛋白及编码基因，通过这5个基因表达水平的变化可以评价保健酒的补肾功能。本发明将中医传统理论与分子生物技术相结合，从基因水平阐述保健酒产生补肾作用的机理所在，为保健酒功能机理研究提供了很好的思路和方法。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及补肾蛋白或其编码基因在保健酒补肾功能评价中的应用。

背景技术

中医认为“正气存内，邪不可干”，人体正气充足就不容易得病。中医学认为肾是人体阴阳的调控中心，大量的现代研究提示肾虚存在下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴(HPAT)不同环节的紊乱，补肾能明显改善肾虚状态下的神经内分泌功能低下，提高下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺轴(HPAT)的功能，是目前补肾机理研究的核心依据。

基因表达谱芯片是采用cDNA(互补脱氧核糖核酸)或寡核苷酸片段作为探针，固化在芯片上，分析两组间样品与探针杂交的荧光强度的比值，来检测基因表达的变化。这种大规模、高通量的对成千上万个基因同时进行筛选，使保健酒补肾作用机理研究更加高效，便捷。ACTH(促肾上腺皮质激素adreno-cortico-tropic-hormone)是维持肾上腺正常形态和功能的重要激素,设置ACTH组做为补肾参照基因(阳性对照)，大鼠灌胃保健酒后与ACTH组进行差异基因的比对，探索保健酒是否有与ACTH类似的补肾作用。

随着人们对健康生活的不断追求，保健酒品种层出不穷，质量参差不齐，过多的保健功能虚假宣传已严重影响消费者对保健酒行业的信任，甚至影响整个行业的发展。保健酒中多以补益类中药组成的大复方，富含多种保健功能，目前研究保健食品的作用机理方法以常规的动物实验、人体试食耗时时间长为多，但是过程不易控制、人力成本高、结果不准确等特点。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种补肾蛋白或其编码基因在保健酒补肾功能评价中的应用。

第一方面，本发明提供补肾蛋白或其编码基因在肾功能评价中的应用，所述补肾蛋白为Cyr61、Zfp568、Plk3、Gadd45α、Ptgs2中的一种或多种。

进一步地，述Cyr61的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述Zfp568的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述Plk3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述Gadd45α的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述Ptgs2的氨基酸序列如SEQ ID NO5所示。

本发明进一步提供补肾蛋白或其编码基因在保健酒补肾功能评价中的应用，所述补肾蛋白为Cyr61、Zfp568、Plk3、Gadd45α、Ptgs2中的一种或多种。

进一步地，所述补肾功能为恢复下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能受抑制造成的肾阳虚的功能。

进一步地，可以设计针对这5个蛋白的编码基因的引物，通过引物检测这5个蛋白的编码基因的表达水平变化反应保健酒的补肾功能，可以将这些引物组合起来形成用于检测保健酒补肾功能的试剂盒。

例如使用如下引物(SEQ ID NO.11-SEQ ID NO.20)：

Cyr61-F：5’-ACTGAAGAGGCTTCCTGTCTTT-3’；

Cyr61-R：5’-TGGTAACTCGTGTGGAGATGC-3’。

Zfp568-F：5’-TCCCTATGAGTTCAGCGTGC-3’；