[发明专利]用于同步检测CYP3A4基因两个SNP位点多态性的方法在审
申请号: | 202010369739.5 | 申请日: | 2020-04-30 |
公开(公告)号: | CN111500707A | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
发明(设计)人: | 李晓娇;智慧芳;倪君君 | 申请(专利权)人: | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人: | 解政文 |
地址: | 101111 北京市大兴区经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 同步 检测 cyp3a4 基因 两个 snp 多态性 方法 | ||
1.一种用于同步检测CYP3A4基因两个SNP位点多态性的引物组,其特征在于,所述引物组包含两组引物对:第一组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.2所示;第二组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.3所示,下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.4所示。
2.根据权利要求1所述的引物组,其特征在于,所述SNP位点是CYP3A4基因的*1B(rs2740574)和*1G(rs2242480)位点;所述第一组引物对是用于检测CYP3A4基因*1B(rs2740574)的引物对,第二组引物对是用于检测CYP3A4基因*1G(rs2242480)的引物对。
3.权利要求1或2所述的引物组在制备用于同步检测CYP3A4基因两个SNP位点多态性的试剂盒中的应用。
4.一种用于同步检测CYP3A4基因两个SNP位点多态性的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1或2所述的引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,还包含DNA聚合酶、PCR缓冲液、4种dNTP的混合物和超纯水。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA聚合酶的用量为0.5-5U,每种dNTP的终浓度均为50-500μM,引物的终浓度为20-300nM。
7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒,其特征在于,还包含待测样品DNA提取试剂或DNA提取试剂盒。
8.一种用于同步检测CYP3A4基因两个SNP位点多态性的检测方法,其特征在于,采用权利要求1或2所述的引物组对待测样品进行多重PCR检测。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,包括步骤:
(1)从待测样品中提取基因组DNA,作为扩增模板;
(2)配制包含所述引物组和所述扩增模板的多重PCR反应体系;
(3)对所述多重PCR反应体系进行多重PCR扩增反应,得到PCR产物;
(4)根据所述PCR产物,测定CYP3A4基因两个SNP位点多态性。
10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述PCR扩增反应的反应条件为:92~96℃:1~10min;93~98.5℃:5~40s;51~68℃:10~60s;67~72℃:10s~5min;共25~45个循环;68~72℃:0~30min。
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