[发明专利]流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置及其制备方法

权利要求书

1.一种流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：

(a)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金；

(b)采用步骤(a)中制得的胶体金标记抗人IgM抗体，获得免疫胶体金；

(c)采用喷金缓冲液稀释步骤(b)的免疫胶体金获得免疫胶体金溶液，用免疫胶体金溶液喷涂于玻璃纤维垫，制得免疫胶体金玻璃纤维膜；

(d)将硝酸纤维素膜用聚乙二醇丙三醇处理液预处理后，喷点与油酸修饰的硫化锌纳米颗粒分别结合的流感病毒A抗原、流感病毒B抗原、2019新型冠状病毒S抗原作为检测线，喷点羊抗鼠IgG抗体作为质控线，制得免疫硝酸纤维素膜；

(e)将预处理的样品垫、步骤(c)制备的免疫胶体金玻璃纤维膜、步骤(d)制备的免疫硝酸纤维素膜、吸水纸依次粘贴在塑料板上，切裁制得检测试剂条，最后将检测试剂条装入塑料外壳。

2.根据权利要求1所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(a)所述的采用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金颗粒粒径为20～60nm。

3.根据权利要求1所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(c)所述的喷金缓冲液由Tris-HCL液、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白BSA组成，pH值8.5，其中Tris-Hcl浓度为0.02mol/L，蔗糖浓度为5～20％，海藻糖浓度为1～5％，牛血清白蛋白BSA浓度为0.5～1％。

4.根据权利要求1所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(d)所述的将硝酸纤维素膜用聚乙二醇丙三醇处理液预处理是：用聚乙二醇丙三醇处理液浸泡硝酸纤维素膜1h，并慢速振荡摇晃，取出后用蒸馏水清洗3遍，最后在真空干燥箱中干燥；

步骤(d)所述的油酸修饰的硫化锌纳米颗粒分别结合流感病毒A抗原、流感病毒B抗原、2019新型冠状病毒S抗原是：以油酸修饰的ZnS作为载体，取1mL流感病毒A抗原、流感病毒B抗原、2019新型冠状病毒S抗原溶液，搅拌1小时后，分别以12000rpm，8500rpm和7000rpm离心10分钟收集，去离子水各洗2遍。

5.根据权利要求1或4所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(d)所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇稀释到浓度为0.5％组成，经0.22μm滤膜过滤，备用。

6.根据权利要求1或4所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(d)所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇和多聚赖氨酸，SIGMA,150KD～300KD，混合组成，其中聚乙二醇丙三醇浓度为0.5％，多聚赖氨酸浓度为0.5％，经0.22μm滤膜过滤，备用。

7.根据权利要求1或4所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(d)所述的聚乙二醇丙三醇处理液由聚乙二醇丙三醇、多聚赖氨酸，SIGMA,150KD～300KD、PEG20000混合组成，其中聚乙二醇丙三醇浓度为0.5％，多聚赖氨酸浓度为0.5％，PEG20000浓度为0.1％，经0.22μm滤膜过滤，备用。

8.根据权利要求1或4所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(d)所述的油酸修饰的硫化锌纳米颗粒制备方法：取油酸无水乙醇溶液15ml加入到15ml浓度为0.3mol/L的醋酸锌水溶液中，40℃水浴搅拌，用氨水调节pH值，再加入15ml浓度为0.3mol/L的硫化钠水溶液，反应5min后，加入5ml SDS水溶液，待混合均匀后，将该反应液倒入90ml水热釜中，水热釜密闭后放入恒温干燥箱内，在一定温度下恒温反应一定时间，待反应结束，降温至50℃，取出产物，用丙酮、去离子水、乙醇洗涤，离心分离，在50℃下真空干燥2h得到粉体ZnS，存放待用。

9.根据权利要求1所述的流感病毒和2019新型冠状病毒抗体联合检测装置的制备方法，其特征在于：步骤(e)所述的预处理的样品垫采用的样品垫处理液由Tris-HCL液、牛血清白蛋白BSA、酪蛋白、表面活性剂烷基酚聚氧乙烯醚组成，其中Tris-HCL液浓度为0.1mol/L，牛血清白蛋白BSA浓度为0.5～1％，酪蛋白浓度为0.1～0.2％、表面活性剂浓度为0.5～1％。