[发明专利]GDF15快速定量检测装置及其制备方法

说明书

本发明涉及一种GDF15快速定量检测装置及其制备方法，属于医疗检测设备领域。由固相有高特异性生长分化因子15抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体的硝酸纤维素膜、吸附有胶体金标记生长分化因子15抗体的玻璃纤维膜、样品垫、吸水纸等其它辅料粘贴制成。采用聚乙二醇丙三醇处理液对硝酸纤维素膜进行预处理，将生长分化因子15抗体先与油酸修饰的硫化锌纳米颗粒结合再吸附到硝酸纤维素膜上，并配制合适的喷金缓冲液和样品垫处理液，在保证免疫胶体金释放完全的基础上，有效的提高了反应的灵敏度，同样的阈值下，还可降低免疫胶体金的用量，节约成本，又没有增加生产操作的复杂度；检测试纸灵敏度高、特异性强、实用性强。

技术领域

本发明涉及医疗检测设备领域，特别涉及一种GDF15快速定量检测装置及其制备方法，利用胶体金免疫层析技术以及双抗体夹心法原理定量检测全血、血清、血浆或者相关液体标本中人GDF15的检测装置及其制备方法，可实现GDF15标志物的灵敏、特异、快速检测。

背景技术

在医学领域，对机体发生的异常情况进行精准预警和评估，一直是医学工作者研究和攻克的主要课题之一；比如正常生理情况下，人体会发生什么风险；比如病理情况下，如何及早精准预警、如何精准评估疾病转归或者发展等；因此通过一个有效的标志物检测，进而实现上述目标，是非常必要的。

生长分化因子15(GDF15)是转化生长因子β家族一个类型，由于广泛存在各类细胞,导致其专业命名的多样性，又称前列腺衍生因子(PDF)、胎盘转化生长因子β(PTGFβ)、胎盘骨形态发生蛋白(PLAB)、非甾体抗炎药激活基因-1(NAG-1)、巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)。GDF15在血液和相关液体中很容易检测到，在生理状态下，有些情况下GDF15会出现升高，及时监测便于对发生异常情况风险进行有效、及时预警；此外，GDF15浓度在很多病理条件下也会升高，例如：心肌梗塞和心衰等心脏损伤性疾病、肿瘤、炎症、急慢性疾病、青光眼等。

在生理条件下，胎盘是唯一能大量表达GDF15的组织；GDF15位于胎盘和胎膜上,这表明其在母-胎界面起作用；它可能通过抑制子宫中的促炎细胞因子和提高、或者提高半同种异体胎儿免疫耐受来支持胎儿存活。也有研究证明GDF15通过抑制外周血单核细胞增殖起免疫抑制的作用并诱导在CD4+、CD25+细胞forkhead box protein3的表达；妊娠特征性的高GDF15水平从一个正常水平逐步升高，在妊娠第九个月增加到峰值，因此在妊娠6和13周时GDF15检测浓度降低时会出现流产，因此在次期间及时检测GDF15水平非常关键和具有极大价值。

GDF15能在不同的细胞压力信号下出现增多，如低氧或缺氧、炎症、急性组织损伤和肿瘤等；在病理条件下进行监测GDF15，并为临床应用做预测性支持；在病理上，GDF15是一个综合信号；在癌症领域，GDF15在前列腺癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、口腔鳞状细胞癌、黑色素瘤、胶质瘤等疾病中表达和分泌显著增强；在心血管领域，GDF15是一个预测疾病的独立因子，其直接参与心肌纤维化和心肌重构的病理生理过程，是继髓过氧化物酶(MPO)之后的一个新型心血管炎症标志物，GDF15是一种跨膜蛋白，能够作为细胞损伤和炎症反应的标志物，其可诊断动脉粥样硬化性疾病，其可预警和评估心肌梗塞、心衰等严重心血管事件发生风险程度。在所有慢病领域，比如风湿性关节炎、终末期肾功能衰竭、糖尿病，和在癌症、心血管疾病领域一样，GDF15的浓度变化对疾病的进展同样是一个独立的预测因素。GDF15也是评估青光眼严重程度的一个重要生物标志物，研究发现青光眼患者GDF15浓度显著高于正常人，且其浓度越高眼功能越差，呈正相关性；因此检测其浓度可以评估青光眼的严重程度，且可以预测视网膜细胞等死亡风险程度。

综上，不论在相关人群生理情况下、还是病理情况下的相关群体，及时进行GDF15的检测和监测是非常必要的；纵观各方法学，胶体金免疫层析技术能够实现对GDF15的精准加测，且可实现高灵敏度、高特异性、快速检测。