[发明专利]一种用于核酸疫苗增强剂的纳米材料

说明书

本发明提供了一种用于核酸疫苗增强剂的纳米材料，其特征在于，所述纳米材料通过以下方法制备获得：(1)制备A溶液：将CaC_l2与Tris buffer溶于水中；(2)制备B溶液：将HEPES缓冲液与水混合；(3)将B溶液滴加到A溶液中，搅拌，制得CP纳米颗粒沉淀；(4)将帕米膦酸钠滴加到步骤(3)的AB混合液中，滴加人血丙种球蛋白，获得本发明的纳米材料。本发明的纳米材料显著提高核酸疫苗对靶细胞的转染效率，增加抗原表达，促进抗原提呈细胞成熟从而建立有效的免疫反应，实现核酸疫苗的增强或增效功能。

技术领域

本发明属于纳米材料技术领域，具体涉及一种用于核酸疫苗增强剂的纳米材料。

背景技术

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)导入动物或人体细胞内，并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗相比传统疫苗具有很多优点，目前已有核酸疫苗进入临床阶段甚至上市应用。但是，如何让核酸疫苗在进入机体后能够顺利到达靶细胞并有效表达和提呈抗原蛋白，一直是阻碍核酸疫苗快速发展和加速应用的瓶颈。

目前，因为核酸疫苗进入机体后，只有极少量的核酸疫苗(2％)能够自由进入细胞，而能到达靶细胞(抗原提呈细胞)的疫苗则更少，造成核酸疫苗免疫用量大，副作用较大，成本过高，且免疫效果不理想。核酸疫苗免疫机体后，必须在抗原提呈细胞中有效表达抗原蛋白，加工和提呈抗原并完成细胞成熟免疫反应才能建立，而如果核酸疫苗进入的是未成熟的抗原提呈细胞，则依然不能实现抗原蛋白的表达，造成免疫效率低下。有很多开发出的核酸疫苗不能最终用于临床，不是因为疫苗本身设计的问题，而是没有一种核酸疫苗增强剂来提高它对有效细胞的转染效率，无法建立有效的免疫反应，最终无奈放弃对该疫苗的进一步开发与推广应用。

虽然目前有一些零星研究用纳米材料辅佐核酸疫苗增强免疫反应，它们被称为疫苗佐剂，而且只针对抗原提呈某一环节。我们提出的核酸疫苗增强剂不同于佐剂，是从核酸疫苗整个体内环节包括，疫苗保护，促进进入抗原提呈靶细胞，提高抗原提呈靶细胞成熟，增强蛋白的转录表达和抗原加工提呈，全面提升核酸疫苗效率。

目前还没有核酸疫苗增强(效)剂的报道。本专利弥补了这一空白，可以极显著提高核酸疫苗对靶细胞的转染效率，增加抗原表达，促进抗原提呈细胞成熟从而建立有效的免疫反应，实现核酸疫苗的增强或增效功能。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种用于核酸疫苗增强(效)剂的纳米材料，可以更有效把核酸疫苗送入靶细胞并显著提高抗原蛋白的表达和提呈，因而从多个环节提高免疫反应。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种用于核酸疫苗增强剂的纳米材料，通过以下方法制备获得：

(1)制备A溶液：将CaCl₂与Tris buffer溶于水中；

(2)制备B溶液：将HEPES缓冲液与水混合；

(3)将B溶液滴加到A溶液中，搅拌，制得CP纳米颗粒沉淀；

(4)将帕米膦酸钠滴加到步骤(3)的AB混合液中，滴加人血丙种球蛋白，获得本发明的纳米材料。

优选地，CaCl₂的浓度为1.0～2.0M；所述Tris buffer的浓度为10mM，pH值为10。

优选地，所述HEPES缓冲液包括以下组分：200～280mM NaCl、10～15mM Na₂HPO₄和24～50mM HEPES。本发明所述HEPES为4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸。

优选地，所述帕米膦酸钠(Pamidronate)的浓度为0.1-5mg/mL。