2.一种权利要求1所述的2'-岩藻糖基乳糖高产菌株（Escherichia coli）的制备方法，其特征是：包括下列步骤：
（1）构建E. coli BL21(DE3)-1：
以Escherichia coliMG1655基因组为模板，设计引物：上游引物：manB-F：CCGGAATTCATGATAAATATGGTCGTGTTGAGGA，下游引物：manB-R：CGCGGATCCTTACAAAAGAGTAACTTTATGCAAA；PCR扩增磷酸甘露糖变位酶表达基因表达基因manB序列；将上述PCR产物与pCDF-Duet质粒进行EcoRI/BamHI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的manB基因片段与pCDF-Duet质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，链霉素抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pCDF-Duet-manB；
以E. coli MG1655基因组为模板，设计上游引物：manC-F：CCCAAGCTTATGAGCTCACCTCTTATTCCGGTTA，下游引物：manC-R：AAATATGCGGCCGCTCAATCTTCAAATCGAAGGATATCA；PCR扩增甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶表达基因manC序列；将上述PCR产物与pCDF-Duet-manB质粒进行HindIII/NotI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的manC基因片段与pCDF-Duet-manB质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，链霉素抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pCDF-Duet-manB-manC；
以E. coli MG1655基因组为模板，设计上游引物：gmd-F：GGGAATTCCATATGTCAAAAGTCGCTCTCATCACCG，与下游引物：gmd-R：CGGGGTACCATGTCAAAAGTCGCTCTCATCACCG；PCR扩增GDP-甘露糖-4 ,6-脱水酶表达基因gmd序列；将上述PCR产物与pCDF-Duet-manB-manC质粒进行NdeI/KpnI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的gmd基因片段与pCDF-Duet-manB-manC质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，链霉素抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pCDF-Duet-manB-manC-gmd；
以E. coli MG1655基因组为模板，设计上游引物：flc-F：CCGGAATTCATGAGTAAACAACGAGTTTTTATTG，下游引物：flc-R：CGCGGATCCTTACCCCCGAAAGCGGTCTTGATTC；PCR扩增GDP-L-岩藻糖合酶表达基因flc序列；将上述PCR产物与pACYC-Duet质粒进行EcoRI/BamHI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的flc基因片段与pACYC-Duet质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，氯霉素抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pACYC-Duet-flc；
基于Helicobacter pylori基因组中提供的α-1,2-岩藻糖转移酶的序列，设计上游引物：futC-F：GGGAATTCCATATGGCTTTTAAGGTGGTGCAAATTT，下游引物：futC-R：CGCGGATCCTTAAGCGTTATACTTTTGGGATTTC；PCR扩增α-1,2-岩藻糖转移酶基因；将上述PCR产物与pACYC-Duet质粒进行NdeI/KpnI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的futC基因片段与pACYC-Duet-flc质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，氯霉素抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pACYC-Duet-flc-futC；将上述质粒pCDF-Duet-manB-manC-gmd、pACYC-Duet-flc-futC转化大肠杆菌BL21（DE3）中构建E. coli BL21(DE3)-1；
（2）构建得到重组菌株E. coli BL21(DE3)-3：
以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）168基因组为模板，设计上游引物：scrB-F：CATGCCATGGATGACAGCACATGACCAGGAGCTTC，下游引物：scrB-R：CGCGGATCCCTACATAAGTGTCCAAATTCCGACA；PCR扩增蔗糖转运蛋白之一的scrB表达基因scrB序列；将上述PCR产物与pET-Duet质粒进行NcoI/BamHI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的scrB基因片段与pET-Duet质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，氨苄抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pET-Duet-scrB；
以E. coli K-12基因组为模板，设计上游引物：scrY-F：GGGAATTCCATATGATGTATAAAAAAACAACTTTGGCAG，下游引物：scrY-R：CGGGGTACCTTAAAACCAGGTTTCCATTTGGACA；PCR扩增蔗糖转运蛋白之一的scrY表达基因scrY序列；
将上述PCR产物与pET-Duet质粒进行NdeI/KpnI双酶切，酶切产物经胶回收纯化后，将所获得的scrY基因片段与pET-Duet-scrB质粒酶切片段利用DNA连接酶进行过夜连接；连接产物经热激转化E. coli JM109感受态，氨苄抗性平板筛选转化子并培养，进行质粒提取和酶切或PCR验证，得到构建成功的质粒pET-Duet-scrB-scrY；将上述质粒pET-Duet-scrB -scrY质粒转化至E. coli BL21(DE3) -1中，获得重组菌株E. coli BL21(DE3)-2；
以E. coli BL21（DE3）基因组为模板，设计基因敲除所需sgRNA及同源臂引物，PCR扩增lacZ基因上下游同源臂；胶回收之后得到纯的敲除基因片段，接E. coli BL21(DE3)/pKD46于30 ℃培养，OD600达到0.1时，加入终浓度为0.2%的L-阿拉伯糖诱导pKD46-λ-red系统表达，当OD600达到0.3~0.4时，制备感受态，加入敲除基因片段于感受态中，电转后，敲除lacZ基因，获得重组菌E. coli BL21(DE3)-2/△lacZ；
以上述的重组菌株E. coli BL21(DE3)-2/△lacZ为出发菌株，分别设计lacY-F：GGGAATTCCATATGATGTACTATTTAAAAAACACAAACT，下游引物：lacY-R：CGCGGATCCTTAAGCGACTTCATTCACCTGACGA，扩增E. coli K-12中的lacY表达基因lacY，并通过融合PCR分别将该基因与大肠杆菌中强启动子PssrA融合，构建lacY的高效表达阅读编码框；随后，利用大肠杆菌中的同源整合系统，将上述表达框整合至前述的重组菌株中，构建得到重组菌株E. coli BL21(DE3)-3，即2'-岩藻糖基乳糖高产菌株Escherichia coli。
