[发明专利]一种光化学诱导猕猴脑卒中模型的方法

说明书

本发明涉及一种光化学诱导猕猴脑卒中模型的方法，包括如下步骤，1）静脉推入20mg/kg玫瑰红；2）分别连续照射猕猴大脑中动脉远端三个部位，各20分钟。通过在猕猴三个大脑部位连续进行光化学诱导的方法，构建损伤较持久的猕猴脑卒中模型，操作简单，且造模效果持久，对猕猴创伤较小，致死率低，用于研究脑卒中的发病机制及治疗策略，研究对脑卒中的临床前试验具有重要意义。

技术领域

本发明属于医学动物模型研究技术领域，具体涉及一种光化学诱导猕猴脑卒中模型的方法。

背景技术

全世界每6个人中有1人可能在一生中罹患脑卒中。中国脑卒中患病率增长迅速，该病发病率高、致死率高、致残率高。脑卒中是世界人群死亡的主要原因，在总死亡中所占比例为20%左右。除了导致死亡外，中、重度脑卒中往往伴有后遗症，比如运动和认知障碍等，给病人和家属带来极大的痛苦。因而，采用实验动物制备脑卒中模型，研究脑卒中的预防和治疗，是生物学，乃至医学界急需解决的课题之一。现有的大多数中风模型都是与啮齿动物和其他小动物一起开发的，在康复过程中，脑梗死后出现颞部偏瘫，恢复时间快。使得这些模型不适合模拟人类中风，最重要的是，啮齿动物在生理条件、大脑解剖结构和血管血液供应方面与人类有很大不同。因此，啮齿动物模型不能总是反映人类的情况。

恒河猕猴（rhesus monkey，以下简称猕猴）在基因、解剖、病理、生理，分子调控和行为上均与人类接近，具有颗粒层细胞构筑清晰的前额叶、发育完善的联合皮质、较高的认知水平、复杂的行为，在模拟人类脑疾病上具备其他实验动物不可替代的优势。

现在的猕猴大脑中动脉栓塞模型有1、开颅大脑中动脉夹闭，此方法操作复杂，需要一定具备外科操作技术人员操作，且易造成巨大损伤，致死率较高。2、在DSA下经猕猴股动脉穿刺微导管大脑中动脉栓塞术，此方法需要具有复杂的设备，且操作人员具备一定的介入技术功底，对猕猴创伤较大，致死率较高。

因此基于目前已有的非人灵长类动物大脑中动脉栓塞模型较少，其均存在弊端，且由于猕猴大脑的代偿作用导致自身运动感觉机能恢复非常快，造模效果不能持久，亟待发明一种新的猕猴大脑中动脉栓塞技术方案来解决上述技术问题。

发明内容

针对上述问题，本发明提供一种操作简便、对猕猴创伤较小的损伤较持久的光化学诱导猕猴大脑中动脉栓塞的方法。

具体技术方案是：一种光化学诱导猕猴脑卒中模型的方法，包括如下步骤：

1）静脉推入20mg/kg玫瑰红。

2）分别连续照射猕猴大脑中动脉三个部位，各20分钟：

A.第一个部位是与中央沟延长线相交的外侧沟位置；

B.第二个是靠近外侧裂的中央前回位置；

C.第三个是靠近外侧裂的中央后回位置。

进一步，所述步骤2）照射采用1,400,000 lux的冷绿光源。

进一步，所述步骤1）静脉注射时间为6分钟。

目前，各种动物脑缺血模型几乎集中在啮齿类动物或其他小型动物上进行，鲜见非人灵长类动物模型。卒中治疗学术产业委员会（STAIR）认为因为人类和猕猴具有相似的颈内动脉解剖结构，以及皮层-运动神经元直接投射，猕猴在脑卒中疾病建模方面比其他常规实验动物具有明显的优势。

灵长类动物大脑中动脉为大脑主要供血部位，因其结构和分支，主要分为M1，M2，M3，M4等分段，它们分别给各个脑区供血。其中M1和M2为中动脉近端，M3和M4为中动脉远端区域。损伤这些区域，将产生较大影响，包括偏瘫等运动障碍，以及感觉障碍。并有可能造成更为广泛的运动和认知障碍，海马、丘脑、黑质等远端核团受损，核团内神经元死亡，胶质细胞增生，纹状体内的GABA神经元大量丢失。