[发明专利]一种异牡荆素-2″-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：制备水提取溶液

取新鲜的黄精属植物的地上部位为原料，清洗，切碎，进行提取，过滤去掉残渣，减压浓缩至无醇味，得到水提取溶液；

步骤2：制备碳苷黄酮流份

将步骤1得到的水提取溶液以羟丙基葡聚糖凝胶色谱柱Sephadex LH-20进行柱层析，先用1-4倍柱体积的去离子水进行洗脱，再用2-6倍柱体积的洗脱剂进行梯度洗脱，然后通过薄层色谱检测，收集合并碳苷黄酮流份；其中，所述洗脱剂为体积浓度为10％-80％的甲醇水溶液和体积浓度为10％-80％的乙醇水溶液中的任意一种；所述梯度洗脱为每10％体积浓度为一个梯度，每0.1L为一个流份，洗脱速度为2ml/min；

步骤3：制备异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷单体流份

将步骤2得到的碳苷黄酮流份减压浓缩至无醇味，得到混合溶液；

取小孔径分离树脂加压装柱，先用3倍柱体积的甲醇活化平衡柱子，再加2-3倍柱体积的去离子水将甲醇置换掉；

将上述混合溶液缓慢滴加上样，上样完毕静置1h-1.5h，先用2倍柱体积的去离子水进行洗脱，再用3倍柱体积的与步骤2相同的洗脱剂进行梯度洗脱，然后通过薄层色谱检测，收集合并异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷单体流份；所述梯度洗脱为每10％体积浓度为一个梯度，每0.01L为一个流份，洗脱速度为2ml/min；

步骤4：制备异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

将步骤3得到的异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷单体流份减压浓缩至无醇味，得浸膏，再经干燥，即得到异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.根据权利要求1所述的异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述黄精属植物地上部位包括黄精、滇黄精和多花黄精中的任意一种的茎和/或叶；所述切碎的粒径为2cm-3cm；所述减压浓缩的压力为50KPa-100KPa，温度为50℃。

3.根据权利要求1所述的异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述提取采用常温浸提、加热提取和超声提取中的任意一种。

4.根据权利要求3所述的异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，所述常温浸提的具体方法是：在清洗切碎后的原料中，加入原料8-15倍重量的体积浓度为10％-80％的甲醇水溶液和体积浓度为10％-80％的乙醇水溶液中的任意一种，于室温提取，每次3d，共2-4次；

所述加热提取的具体方法是：在清洗切碎后的原料中，加入原料8-15倍重量的体积浓度为10％-80％的甲醇水溶液和体积浓度为10％-80％的乙醇水溶液中的任意一种，于30℃-60℃提取，每次3h-7h，共2-4次；

所述超声提取的具体方法是：在清洗切碎后的原料中，加入原料5-15倍重量的体积浓度为10％-80％的甲醇水溶液和体积浓度为10％-80％的乙醇水溶液中的任意一种，采用功率为100W，频率为40kHz超声提取，每次0.5h，共3次。

5.根据权利要求1所述的异牡荆素-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法，其特征在于，步骤2中，所述羟丙基葡聚糖凝胶色谱柱Sephadex LH-20为10cm×100cm，填料粒径为27μm-163μm；所述薄层色谱检测的条件为：硅胶GF₂₅₄板，展开剂为甲苯：甲酸乙酯：甲酸体积比1:7:1，直立上行展开，显色剂为质量浓度为1％的FeCl ₃-乙醇溶液，显黄色和/或黄绿色的洗脱部位，即为碳苷黄酮流份。