[发明专利]一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法

权利要求书

1.一种评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，所述方法包括：

对转基因大豆与野生大豆分批种植，使二者的花期相遇；通过人工杂交方式获得转基因大豆与野生大豆的杂交后代或回交后代，再通过杂交后代或回交后代的自交获得更多世代的试验材料；

开展杂交后代或回交后代与其亲本的同质园种植比较试验；

测定并计算试验材料的各适合度性状，得到试验材料适合度性状的相对适合度，以及各供试材料的总适合度；

适合度性状的相对适合度计算方法：以野生大豆为比较的标准“1”，相应杂交或回交后代的各适合度性状与野生大豆的该适合度性状之比为相对适合度值，总适合度值是其各适合度性状的相对适合度值的平均数。

2.根据权利要求1所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，所述适合度性状包括出苗率、子叶真叶大小、株高、地上部干生物量、花器大小、花粉活力、单株结荚数、单株饱粒种子数、结实率、百粒重、种子落粒率、种子活力持续能力。

3.根据权利要求2所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，杂交或回交后代在移栽到盆钵前需要进行分子鉴定，移栽携带抗性基因的植株；分子鉴定步骤为：以野生大豆为阴性对照，转基因大豆为阳性对照，提取杂交后代植株的总DNA，采用PCR后进行琼脂糖凝胶电泳的方法，检测转基因大豆与野大豆的杂交或回交后代中转基因是否存在。

4.根据权利要求2所述的评价转基因大豆与野生大豆杂交或回交后代适合度的方法，其特征在于，适合度性状的调查方法为：

出苗率：将幼苗真叶展开视为出苗，统计播种材料苗期出苗数，出苗率＝出苗数/播种种子数×100％；

子叶真叶大小：第一片复叶未展开时期，利用游标卡尺测量子叶的长度宽度、真叶的长度宽度，子叶真叶大小值为子叶长×宽+真叶长×宽；

株高：第三个三出复叶期利用直尺测量植株顶端到根茎处的高度；

地上部干生物量：成熟后收获植株地上部晒干并称重；

花器大小：在植株盛花期，随机选取单株上不少于50朵完全盛开的花朵，测量萼片长度、翼瓣长度、龙骨瓣长度、花瓣外露长度、沟槽长度，花器大小为五个数值之和；

花粉活力：花粉置于培养基开始后100min时测量有活力的花粉数目；花粉活力＝已萌发的花粉粒数/总花粉粒数；

单株饱粒种子数：统计植株单株饱满种子总数量；

结实率：统计每个荚内的种子粒数和饱满种子粒数，结实率＝每荚饱粒数/每荚总粒数；

百粒重：称量100粒饱满种子的重量；

种子落粒率：统计植株生理成熟(植株上50％的荚其颜色转变为黑褐色)后10d内的落粒种子数，再根据单株种子数计算种子落粒率。种子落粒率＝落粒种子数/单株种子数；

种子活力持续能力：将收获的种子进行土壤埋藏试验，每隔3个月对埋藏种子进行取样，不少于8次，每次取样后对埋藏种子进行种子萌发试验，计算活力指数，活力指数Vi＝Gi×St；Gi：发芽指数；St：发芽t天后幼苗的鲜重，发芽指数Gi＝∑(Gt/Dt)；Gt：在t日内的发芽数；Dt：发芽日数；比较同一取样时间点野生大豆与其杂交或回交后代活力指数的差值，当二者出现最大差值时，此时二者的活力指数作为总适合度的计算指标。