[发明专利]一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法

权利要求书

1.一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、提取充质干细胞，利用血液中提取的成体充质干细胞进行无血清培养；

步骤二、培育充质干细胞，将提取的充质干细胞放入无血清培养基中培养，并在培养基中加入血清普代物，L-谷氮酸酰胺，脱氧核糖核昔，FGF和TGF-B；

其中，无血清培养基中血清曾代物的体积分数为15-20％，L-谷気酸酰胺的浓度为280-300ng/mol，脱氧核糖核昔的浓度为l0-20ng/mol，成纤维细胞生长因子的浓度为15-25ng/mol，转化生长因子・B的浓度为15-25ng/mol，维生素B5的浓度为3-5ng/mol，维生素B12的浓度为0.02ng/mol；

步骤三、提取干细胞外泌体，收集培养基中的上清液，釆用0.2-0. 22md的无菌过滤器对收集得到的混合液进行初次过滤，再用滤膜进行二次过滤，然后经过浓缩、冷冻干燥后，制得干细胞外泌体冻干粉；

步骤四、面膜材料制备，将白芨，川穹，紫草研磨粉碎，并加入重量2倍的甲醇混合溶液进行充分的搅拌得到初步混合液，留待后用，再将甜杏仁油、十二甲基环六硅氧烷、大豆异黄酮、甘硼酸二甲和蛋黄卵磷脂溶于丙三醇溶液进行完全溶解得到混合溶液，再将五元胜肽、羟乙基纤维素钠、鲸蜡硬脂醇依次加入到混合溶液内进行溶解，得到新的化学混合溶液进行保存；

步骤五、合成面膜，将干细胞外泌体冻干粉溶解与步骤四所得的混合溶液内，并加入抗菌剂、乳化剂和活性剂，用磁力棒进行搅拌，调节溶液ph值到6-7，并将所得的溶液以蚕丝布为载体，制得面膜。

2.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：所述步骤一中，在提取充质干细胞时，利用输送泵通过导入管将储液箱中的待分离液吸出，经过滤网过滤留下所需的MSC液体，流出到培养基上，且培养套设置多个空腔能够用于容纳培养基。

3.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：所述步骤三中，滤膜采用无菌滤网，其网孔直径为0.5mm，无菌过滤器和滤膜在使用前用紫外线照射进行消毒杀菌。

4.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：所述步骤四中，白芨，川穹，紫草在负压条件下研磨粉碎，所得的初步混合溶液用冷风吹，再进行速冻干燥处理，控制温度在-10℃-10℃，粉碎物表面温度控制在-20℃—-10℃，研磨时间40-50min，并进行过滤浓缩。

5.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：所述步骤四中，混合化学溶液在真空环境下进行加热至60-70℃，并将五元胜肽、羟乙基纤维素钠、鲸蜡硬脂醇加入后得到新的化学混合溶液进行震荡分散处理20-30min。

6.根据权利要求1所述的一种含有干细胞外泌体成分的面膜制备方法，其特征在于：所述步骤五中，将步骤三和步骤四所得的原料进行混合，并搅拌均匀，高压均质处理15min，静置10-15h。