[发明专利]一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法有效
| 申请号： | 202010386304.1 | 申请日： | 2020-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN111454901B | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 刘明录;卢永灿;金海锋;王立新;强邦明;张传鹏;冯建海;李希鹏;韩庆梅;许淼 | 申请（专利权）人： | 山东兴瑞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/077;C12N11/10;C12N11/04 |
| 代理公司： | 山东华君知识产权代理有限公司 37300 | 代理人： | 武欢欢 |
| 地址： | 261500 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 干细胞 诱导 化成 软骨 细胞 方法 | ||
1.一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法，其特征在于：所述方法，包括制备脂肪干细胞-海藻酸钠悬液、制备脂肪干细胞-海藻酸钙微珠、诱导培养；所述诱导培养，将脂肪干细胞-海藻酸钙微珠加入培养液中进行诱导培养，脂肪干细胞-海藻酸钙微珠的浓度为8×105-1×106个/ml，诱导培养时间为13-15d；
所述培养液为含PRP 、BMP-6、TGF-β1、IGF-1的不完全成软骨诱导培养液；
所述培养液中，PRP的体积浓度为9-11%；所述BMP-6的终浓度为480-520μg/L，所述TGF-β1的终浓度为9-11μg/L，所述IGF-1的终浓度为95-105μg/L。
2.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法，其特征在于：所述不完全成软骨诱导培养液为含6-6.5μg/L胰岛素、48-52nM L-抗坏血酸、95-105nM地塞米松、青霉素98-102U/mL，链霉素为98-102μg/mL、9-11%FBS的高糖DMEM培养基。
3.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法，其特征在于：所述制备脂肪干细胞-海藻酸钠悬液，将P3-P4代的脂肪干细胞，贴壁培养至瓶底的80-90%，加入胰蛋白酶消化液制备ADSCs悬液，细胞浓度为4.2-4.8×106个/ml，然后加入1-1.4 %的海藻酸钠溶液，混合均匀，制备细胞浓度为5.6-6.4×106个/ml的脂肪干细胞-海藻酸钠悬液。
4.根据权利要求1所述的一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法，其特征在于：所述制备脂肪干细胞-海藻酸钙微珠，脂肪干细胞-海藻酸钠悬液滴入预热到36.5-37.5℃的过量的无菌CaCl2 溶液中，形成直径4-5mm脂肪干细胞-海藻酸钙微珠，每个微珠含有274800-275200个细胞；所述CaCl2 溶液的浓度为100-105mM。
5.根据权利要求3所述的一种脂肪干细胞诱导分化成软骨细胞的方法，其特征在于：所述海藻酸钠溶液的温度为36.5-37.5℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东兴瑞生物科技有限公司，未经山东兴瑞生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010386304.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种车载风力发电装置的能量控制系统及控制方法
- 下一篇：一种综控移动托盘
