[发明专利]基于马赛克策略的冠状病毒抗原的构建方法及其应用在审
| 申请号： | 202010387460.X | 申请日： | 2020-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN111533790A | 公开（公告）日： | 2020-08-14 |
| 发明（设计）人： | 孙彩军;杜向军;舒跃龙;李敏超;曾金锋 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C07K14/165 | 分类号： | C07K14/165;C07K19/00;A61K39/215;A61P31/14;A61P11/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 马赛克 策略 冠状病毒 抗原 构建 方法 及其 应用 | ||
1.基于马赛克策略的冠状病毒抗原的构建方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)对人冠状病毒的结构蛋白进行分析，获取结构蛋白上存在的细胞毒性T淋巴细胞表位；
(2)采用马赛克策略对人冠状病毒的结构蛋白进行分析，去除在结构蛋白中出现次数低的罕见表位后，获得由短肽组装形成的冠状病毒抗原。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人冠状病毒包括HCoV-NL63、HCoV-229e、HCoV-OC43、HCoV-HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV或SARS-CoV-2中的任意一种或至少两种的组合。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述结构蛋白包括S蛋白、M蛋白、N蛋白或E蛋白中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述S蛋白上包括221～228个细胞毒性T淋巴细胞表位；
优选地，所述M蛋白上包括51～61个细胞毒性T淋巴细胞表位；
优选地，所述N蛋白上包括54～65个细胞毒性T淋巴细胞表位；
优选地，所述E蛋白上包括14～21个细胞毒性T淋巴细胞表位。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述马赛克策略包括MosaicVaccine Designer程序；
优选地，所述罕见表位在结构蛋白中出现的次数小于3；
优选地，所述短肽的长度为8～10aa。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述冠状病毒抗原包括S蛋白马赛克抗原、M蛋白马赛克抗原、N蛋白马赛克抗原或E蛋白马赛克抗原中的任意一种或至少两种的组合。
6.冠状病毒抗原，其特征在于，所述冠状病毒抗原采用权利要求1-5任一项所述的方法构建得到。
7.根据权利要求6所述的冠状病毒抗原，其特征在于，所述冠状病毒抗原包括S蛋白马赛克抗原、M蛋白马赛克抗原、N蛋白马赛克抗原或E蛋白马赛克抗原中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述S蛋白马赛克抗原中含有的天然细胞毒性T淋巴细胞表位的百分比为89.01％；
优选地，所述M蛋白马赛克抗原中含有的天然细胞毒性T淋巴细胞表位的百分比为87.77％；
优选地，所述N蛋白马赛克抗原中含有的天然细胞毒性T淋巴细胞表位的百分比为91.96％；
优选地，所述E蛋白马赛克抗原中含有的天然细胞毒性T淋巴细胞表位的百分比为92.86％。
8.根据权利要求6或7所述的冠状病毒抗原，其特征在于，所述S蛋白马赛克抗原包括SEQ ID NO:1～4所示的氨基酸序列；
优选地，所述M蛋白马赛克抗原包括SEQ ID NO:5～8所示的氨基酸序列；
优选地，所述N蛋白马赛克抗原包括SEQ ID NO:9～12示的氨基酸序列；
优选地，所述E蛋白马赛克抗原包括SEQ ID NO:13～16所示的氨基酸序列。
9.一种权利要求6-8任一项所述的冠状病毒抗原在制备冠状病毒通用疫苗中的应用。
10.一种携带权利要求6-8任一项所述的冠状病毒抗原的冠状病毒通用疫苗，其特征在于，所述疫苗以pVAX1为DNA疫苗载体，或以删除E1和E3的复制缺陷性2型和5型腺病毒为疫苗载体。
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