[发明专利]小叶丁香的组织培养方法及快速获取小叶丁香大苗的方法

权利要求书

1.一种小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体选择及消毒：

剪取当年生幼嫩枝条顶端部分，将其剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段作为外植体，进行消毒处理；消毒为用次氯酸钠溶液浸泡然后用无菌水冲洗；所述次氯酸钠溶液中有效氯为1％，浸泡时间为20min，无菌水冲洗次数为3-5次；

(2)启动培养：

将外植体放入启动培养基中，使顶芽或腋芽刚好接触培养基，直至顶芽或腋芽萌发；所述启动培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA 1mg/L、激素NAA 0.2mg/L，调节pH为5.8～6.2；

(3)继代培养：

剪取步骤(2)中萌发的腋芽或顶芽并接种于继代培养基中进行培养，直至长出丛生芽；继代培养步骤后还包括继代苗复壮的步骤：将重新长出的丛生芽转移至复壮培养基中直至丛生芽的增殖倍数不低于5，复壮培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA2.4mg/L，调节pH为5.8～6.2；

(4)生根培养：

将新长出的丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，转移至生根培养基中进行培养直至生根得到生根苗；

(5)移栽：

将步骤(4)得到的生根苗用温水洗净根部的生根培养基，然后移栽至基质中进行培养，得到组培生根苗。

2.根据权利要求1所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，所述启动培养过程中萌发的顶芽或腋芽长度为5mm～1cm；所述继代培养基以MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素6-BA 4mg/L，调节pH为5.8～6.2，继代培养过程中丛生芽长至3～6cm；所述生根培养基以1/2MS培养基为基础培养基，同时添加蔗糖30g/L、琼脂6g/L、激素IBA 1.5mg/L，调节pH为5.8～6.2，生根苗的根长为3～4cm，植株高5～6cm。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，继代培养步骤中还包括一次或多次重复继代步骤：

将丛生芽剪切为带有顶芽或1-2个腋芽的茎段，重新转移至新的继代培养基中继续培养，直至重新长出丛生芽且丛生芽高至3～6cm。

4.根据权利要求1-2中任一项所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，启动培养、继代培养、生根培养和继代苗复壮过程中的培养条件为：温度：25±5℃；光照强度：2000～2200lx；光处理：12～14h/d，暗处理10～12h/d，培养20～30d。

5.根据权利要求1-2中任一项所述的小叶丁香的组织培养方法，其特征在于，步骤(5)中移栽的基质为质量比为3:2:1的粗草炭土、粗蛭石和粗珍珠岩的混合物，移栽后浇水，使土壤湿度保持在65～80％直至长出新根，待新长出的根部生长健壮后，使土壤湿度保持在为70～80％。

6.一种利用权利要求1-5中任一项所述的小叶丁香的组织培养方法快速获取小叶丁香大苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)通过组织培养得到组培生根苗；

(2)剪取组培生根苗中带芽茎段作为嫁接穗条，以暴马丁香作为砧木进行嫁接。

7.根据权利要求6所述的快速获取小叶丁香大苗的方法，其特征在于，步骤(2)中，穗条的长度为8-10cm，粗0.2～0.5cm，带有2-3个芽，暴马丁香砧木为至少提前1年种植所得；嫁接前5-7天对砧木栽植地浇透水，利用劈接的方式进行嫁接，劈接口深度为1.5-2cm，嫁接后立即密封嫁接口，嫁接后10-15d再次进行浇水，随时抹除砧木萌芽。