[发明专利]一种天然活性多肽Tubulysin U的制备方法

说明书

本发明提供了一种新型的天然活性多肽Tubulysin U的制备方法，该制备方法将化合物2溶于三氟乙酸，加热回流制备中间体，并与化合物3和二异丙乙基胺反应，得到的产物与2,6‑二甲基吡啶和叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯反应，反应完后加氢氧化钠处理制中间体酸，中间体酸与化合物6、HATU和二异丙乙基胺反应，得到的产物加三苯基膦制中间体胺，并加入化合物8和HATU反应，加入氟化铵制第一中间体，第一中间体加氢氧化钠制第二中间体，第二中间体加醋酸酐制第三中间体，第三中间体再加三氟乙酸制得到第四中间体，第四中间体加甲醛和氰基硼氢化钠反应制目标产物；化合物2、化合物3、化合物6和化合物8的结构为：

技术领域

本发明属于药物合成的技术领域，具体地说，涉及一种天然活性多肽Tubulysin U的制备方法。

背景技术

四肽化合物Tubulysins是2000年由Hofle等从粘细菌中提取出来的，但其晶体结构直到2004年才被确定下来。Tubulysin A-Z是一个家族化合物(见表1)，它们都属于天然产物，其可以用如下的化学结构式表示：

表1 Tubulysins家族化合物的结构式

研究发现Tubulysin U在哺乳动物细胞中显示出极其有效的细胞毒活性，包括多药耐药细胞系，IC₅₀值在较低的纳摩尔范围内(见表2)。Tubulysin U是一种具有细胞毒性活性微管溶素，抑制微管蛋白聚合并导致细胞周期停滞和凋亡。此外，研究表明Tubulysin U同时还具有抑制血管新生和抗多重耐药性的优点。在水溶性方面Tubulysin U相比其它抗癌药物有着明显的优势，其对特定的癌细胞表现出超强的抗癌活性，使其成为新型抗癌新药研发中颇受关爱的目标分子之一。

表2 Tubulysin U对人癌细胞的体外抗增殖活性

从Tubulysin U几年很短的发展历程看，Tubulysin U以其独有的生物活性正在受到越来越多人的关注，在未来的几年可能会成为抗肿瘤药物中的明星分子。但现有技术中，其合成并不理想，至今Tubulysin U及其类似物化学合成上报道的文献有几十篇，而合成路线大部分不是很完美，存在很大的进一步探索的空间。如何找到一条简洁快速、可以大量合成的路线对Tubulysin U的进一步生物研究及尽快应用于临床具有很大意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型的天然活性多肽Tubulysin U的制备方法，该制备方法的合成路线符合绿色化学标准，尽量利用可再生和可回收性资源，所用试剂毒性较小、反应经处理后对环境污染很小。尤其，该制备方法的总产率较高、立体选择性好、实验操作方便、反应条件温和、分离纯化简单、可用于大量制备。

为实现上述效果，本发明采用的技术方案的基本构思如下：

一种天然活性多肽Tubulysin U的制备方法，所述制备方法采用如下所示的路线：

其中，上述路线中使用的化合物3、化合物6和化合物8的结构如下：

包括如下步骤：

步骤1，将化合物2溶于三氟乙酸，加热回流，制备中间体；

将所述中间体溶于无水二氯甲烷中，加入化合物3和二异丙乙基胺，在室温下反应，制备化合物4；

步骤2，将得到的化合物4溶于干燥的二氯甲烷，冰水浴冷却下加入2,6-二甲基吡啶和叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯，室温下反应，制备化合物5；