[发明专利]一株赭曲霉菌株L1295及其应用

说明书

本发明公开了一株赭曲霉(Aspergillus westerdijkiae)菌株L1295 CGMCC N_O.19033。该菌株已于2019年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.19033，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该菌株具有高效赭曲霉毒素A(OTA)合成能力，其发酵提取物中含有高达4.5％赭曲霉毒素A(OTA/发酵提取物比)。

技术领域

本发明涉及微生物菌株技术领域。

背景技术

真菌毒素(mycotoxin)是产毒真菌分泌产生的，能引起人畜各种损害的次级代谢产物。很早以来人们就已经知道有些蘑菇是有毒的，然而直到19世纪50年代才发现被麦角菌感染的黑麦的中毒症状，之后有关真菌毒素对人畜的危害时有报道，关于真菌毒素的研究也成为世界各国科学家的研究热点。

赭曲霉毒素A(OTA)毒性最大，在霉变谷物、饲料等最常见。OTA 通过摄食进入动物体内，经小肠吸收后，主要分布于肾脏、肝脏、肌肉与脂肪中。OTA既能产生急性、亚急性毒性，也可以具有致畸和致癌作用，但是未发现致突变作用。随人们对食品的健康和安全高度重视，对真菌毒素的检测越来越严格，检测范围越来越广泛。目前国内检测所需OTA标准物质绝大多数依赖于进口，价格昂贵。为了保证检测分析所需OTA标准物质的供应，减少进口依赖。筛选获得OTA 高产菌株，对其进行发酵培养，从中分离纯化高纯度的OTA，将为 OTA的分析检测提供来源，也为深入研究OTA及其开发利用提供物质基础。

发明内容

本发明的第一目的是提供一株赭曲霉(Aspergillus westerdijkiae) 菌株L1295CGMCC No.19033。

该菌株已于2019年12月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.19033，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

本发明的第二目的是提供了赭曲霉菌株L1295在制备赭曲霉毒素 A中应用。

本发明的第三目的是提供了一种赭曲霉菌株L1295制备赭曲霉毒素A的方法，其步骤包括：

用赭曲霉菌株L1295制备种子液；

用种子液制备菌株L1295固体发酵培养物；

用菌株L1295固体发酵培养物制备提取物；

用反相中压液相色谱以55-65％的甲醇/水(v/v)溶剂进行洗脱得产物。

进一步地，还包括：用LH-20凝胶色谱以甲醇为洗脱剂进行纯化，再经甲醇重结晶，得到高纯度赭曲霉毒素A。

本发明提供的菌株L1295具有高效赭曲霉毒素A合成能力，其发酵提取物中含有高达4.5％赭曲霉毒素A(OTA/发酵提取物比)。

附图说明

图1为菌株L1295的菌落形态及镜下形态图。

图2为菌株L1295与标准品OTA的HPLC对照图。

图3为菌株L1295样品的LC-MS分析结果的图谱。

图4为菌株L1295样品中OTA的LC-MS分析结果图。

图5为化合物赭曲霉毒素A的氢谱图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。