[发明专利]一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂，其特征在于，所述乳酸菌复合制剂包括植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌、布拉氏酵母菌和枯草芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂，其特征在于，所述植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌、酵母菌和枯草芽孢杆菌的质量比为2:(0.5-1)：(1-1.5)：(1-1.5)：(0.5-1)。

3.根据权利要求2所述的用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂，其特征在于，所述乳酸菌复合制剂的活菌总数≧20亿/克。

4.根据权利要求1或2所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、保加利亚乳杆菌分别接种于MRS培养基中，在35-37℃条件下恒温培养18-24小时，循环传代培养2-3次，得菌体培养物，然后放入发酵罐中，在28℃下按照5％接种量进行二级发酵48h，离心收集菌泥，经真空冷冻干燥获得相应的菌粉；

(2)将酵母菌接种于YPD液体培养基，在25-30℃、150rpm条件下条件下恒温培养18-24小时，然后放入发酵罐中，在28℃下按照5％接种量进行二级发酵48h，离心收集菌泥，经真空冷冻干燥获得酵母菌粉；

(3)将凝结枯草芽孢杆菌原种接种到LB液体培养基中，在35-37℃条件下恒温培养18-24小时，循环传代培养2-3次，得菌体培养物，然后放入发酵罐中，在37℃下按照5％接种量进行二级发酵56h，喷雾干燥，即得枯草芽孢杆菌菌粉；

(4)将步骤(1)至步骤(3)制得的植物乳杆菌粉、鼠李糖乳杆菌粉、保加利亚乳杆菌粉、酵母菌粉和枯草芽孢杆菌粉按照质量比2:(0.5-1)：(1-1.5)：(1-1.5)：(0.5-1)的比例混合均匀，制得乳酸菌复合制剂。

5.根据权利要求3所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中MRS液体培养基的组成为：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、牛肉浸粉10g/L、柠檬酸二铵2g/L、醋酸钠5g/L、吐温80 1g/L、磷酸氢二钾2g/L。

6.根据权利要求4所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中植物乳杆菌的发酵培养基为：葡萄糖38g/L、酵母浸膏54g/L、乙酸钠5g/L、柠檬酸氢二铵2.5g/L、七水硫酸镁0.6g/L、一水硫酸锰0.1g/L、吐温80 1g/L。

7.根据权利要求4所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中鼠李糖乳杆菌发酵培养基为：葡萄糖41g/L、蛋白胨36g/L、酵母浸膏12g/L、乙酸钠5g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、七水硫酸镁0.5g/L、一水硫酸锰0.2g/L、吐温801g/L。

8.据权利要求4所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中保加利亚乳杆菌发酵培养基为：可溶性淀粉38g/L、豆粉34g/L、鱼粉16g/L、糖蜜11g/L，氯化钠3g/L。

9.根据权利要求3所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中YPD液体培养基的组成为：葡萄糖20g/L、蛋白胨20g/L、酵母粉10g/L，所述步骤(2)酵母菌的发酵培养基为：酵母膏5g/L、淀粉20g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏10g/L、尿素10g/L。

10.根据权利要求3所述的一种用于盐碱地培肥的乳酸菌复合制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中LB液体培养基的组成为：白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L,所述步骤(3)中枯草芽孢杆菌的发酵培养基为:豆粕40g/L、玉米粉20g/L、葡萄糖15g/L、磷酸氢二钾3g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸铵0.35g/L、酵母浸粉0.2g/L、硫酸锰0.2g/L、硫酸亚铁0.1g/L、碳酸钙0.1g/L。