[发明专利]一种脱细胞真皮基质组织工程支架及其制备方法

说明书

本发明涉及组织工程支架技术领域，尤其涉及一种脱细胞真皮基质组织工程支架及其制备方法。本发明将异种或异体皮浸入盐溶液中去除表皮组织，得到真皮组织；将真皮组织依次进行灭活处理和脱细胞处理，得到真皮基质；将所得真皮基质顺次进行干燥和细化处理，得到真皮基质纤维；将真皮基质纤维与分散液混合后依次进行冷冻干燥和交联处理，即得脱细胞真皮基质组织工程支架。本发明提供的脱细胞真皮基质组织工程支架，制备时无需酶处理和辅助材料的添加，保持了脱细胞真皮基质优异的生物相容性；且孔隙率高，形状可塑性强，有利于细胞的长入和营养物质的渗透，满足复杂形状缺损的修复。

技术领域

本发明涉及组织工程支架技术领域，尤其涉及一种脱细胞真皮基质组织工程支架及其制备方法。

背景技术

脱细胞真皮基质是由异种或异体皮经过脱细胞处理后得到的一种细胞外基质，因其生物相容性良好，被广泛应用于烧伤、整形、组织工程支架等领域。中国专利CN109675112A公开了一种人源的脱细胞真皮基质的制备方法，该方法制备得到的脱细胞异体真皮基质为片状结构，空隙较为致密，难以满足细胞快速长入和作为三维结构组织工程支架及复杂形状填充物的要求。因此，将片状结构的脱细胞真皮基质构建成三维结构、高孔隙率的支架，将克服传统片状结构真皮基质在三维组织工程支架应用方面的不足，有利于细胞的快速长入，加快组织修复进程。

在增加脱细胞真皮基质的空间尺寸的问题上，中国专利CN102258807B公开了一种组织工程用猪脱细胞真皮基质的调孔方法，但该方法需要将阴离子生物大分子或阳离子生物大分子加入真皮基质中，改变了真皮基质原有的成分构成。另外，为实现真皮基质的三维化及获得高孔隙率，中国专利CN109821071A公开了一种基于脱细胞真皮基质的水凝胶及其制备方法，但该方法需要引入胃蛋白酶、胰酶等蛋白酶消化处理，酶处理将会消化真皮基质中的蛋白，降低真皮基质中蛋白聚糖等成分的含量，并且酶处理时间较长，过程较为繁琐。因此，开发一种简单、不改变真皮基质原有成分、具有三维高孔隙结构的脱细胞真皮基质具有重要的临床医用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脱细胞真皮基质组织工程支架及其制备方法，该脱细胞真皮基质组织工程支架为三维多孔结构，具有高孔隙率的特点，克服了传统真皮基质组织工程支架的缺陷和不足。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种脱细胞真皮基质组织工程支架的制备方法，包括如下步骤：

(1)将异种或异体皮浸入盐溶液中去除表皮组织，得到真皮组织；

(2)将真皮组织依次进行灭活处理和脱细胞处理，得到真皮基质；

(3)将所得真皮基质顺次进行干燥和细化处理，得到真皮基质纤维；

(4)将真皮基质纤维与分散液混合后依次进行冷冻干燥和交联处理，得到脱细胞真皮基质组织工程支架。

作为优选，步骤(1)中所述异种或异体皮与盐溶液的质量体积比为1g:4～6mL，所述盐溶液为氯化钠溶液，所述氯化钠溶液的浓度为1～2mol/L。

作为优选，步骤(2)中所述灭活处理为用酒精灭活，所述真皮组织与酒精的质量体积比为1g:4～6mL，所述酒精的体积浓度为70～80％，所述灭活处理的时间为1～4h。

作为优选，步骤(2)中所述脱细胞处理为将真皮组织浸泡于碱性溶液和聚乙二醇辛基苯基醚水溶液中，所述真皮组织与碱性溶液的质量体积比为1g:4～6mL，浸泡时间为6～24h，所述碱性溶液的浓度为0.5～2mol/L；所述真皮组织与聚乙二醇辛基苯基醚水溶液的质量体积比为1g:5～15mL，浸泡时间为12～24h，所述聚乙二醇辛基苯基醚水溶液的浓度为0.05～0.15％。

作为优选，步骤(4)中所述分散液为水、生理盐水、叔丁醇中的一种或多种，所述真皮基质纤维与分散液的质量体积比为1g:40～60mL。