[发明专利]检测人AR-V7及AR基因表达的引物探针组合物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种检测人AR-V7及AR基因表达的引物探针组合，其特征在于，包括：

AR-V7正向引物，具有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列；

AR-V7反向引物，具有如SEQ ID NO.2所示核苷酸序列；

AR-V7探针，具有如SEQ ID NO.3所示核苷酸序列；

AR正向引物，具有如SEQ ID NO.4所示核苷酸序列；

AR反向引物，具有如SEQ ID NO.5所示核苷酸序列；

AR探针，具有如SEQ ID NO.6所示核苷酸序列；

GAPDH正向引物，具有如SEQ ID NO.7所示核苷酸序列；

GAPDH反向引物，具有如SEQ ID NO.8所示核苷酸序列；

GAPDH探针，具有如SEQ ID NO.9所示核苷酸序列。

2.一种检测人AR-V7及AR基因表达的试剂盒，其特征在于，包括：如权利要求1所述的引物探针组合物，DNA聚合酶，dNTPs，反应缓冲液，含有阳性质控品的阳性对照组，含有阴性质控品的阴性对照组。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒使用qRT-PCR或者dPCR对检测样品检测人AR-V7及AR。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述检测样品为人外周全血或者使用人外周全血离心获得的血细胞。

5.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，

所述阳性质控品为AR-V7目标扩增区域的假病毒RNA或者从已知AR-V7阳性的人细胞株提取的RNA；

所述阴性质控品为不包含AR-V7目标扩增区域的假病毒RNA、从已知AR-V7阴性的人细胞株提取的RNA、缓冲液或者RNase-Free ddH₂O。

6.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述AR-V7探针、AR探针及GAPDH探针的3’端标均记有荧光淬灭基团，所述AR-V7探针、AR探针及GAPDH探针的5’端均标记有荧光报告基团。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光淬灭基团选自DABCYL、MGB、BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3或Phosphorothioate中的任意一种；所述荧光报告基团选自FAM、HEX、TET、JOE、NED、VIC、CY3、CY5、ROX或TAMRA中的任意一种。

8.一种对人AR-V7及AR基因表达的检测方法，其特征在于，使用如权利要求2至7中任一项所述的检测人AR-V7及AR基因表达的试剂盒，使用qRT-PCR或者dPCR对检测样品进行检测。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述qRT-PCR或dPCR在执行扩增程序中加入UNG酶的预反应步骤。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括样品预扩增步骤，所述样品预扩增步骤与加入UNG酶的预反应步骤同步进行或分别进行。

11.根据权利要求10所述的检测方法，其特征在于，所述AR-V7正向引物、AR-V7反向引物、AR-V7探针的检测目标区域相同或基本相同；AR正向引物、AR反向引物、AR探针、GAPDH正向引物、GAPDH反向引物及GAPDH探针的检测目标区域相同或部分相同或完全不同。

12.根据权利要求8至11中任一项所述的检测方法，其特征在于，检测方法获得的检测结果用于临床肿瘤的辅助诊断或用药指导。