[发明专利]一种近红外比率型荧光探针及其合成方法与应用

权利要求书

1.一种近红外比率型荧光探针，其特征在于，所述比率型荧光探针具有近红外花菁荧光基团，其结构式为：

2.一种近红外比率型荧光探针的合成方法，具体包括如下步骤：

(1)吲哚季铵盐和(2-氯-3-(羟甲基)环己基)甲醇在正丁醇/苯混合溶剂中分水回流得到化合物1，其中反应体系温度为130℃～150℃，反应时间为10～12h，

(2)在N₂气氛下将上述化合物1与乙酸钠在N,N-二甲基甲酰胺溶剂中反应5～7h，反应温度为85℃～95℃，纯化得到化合物2，

(3)将化合物2和三乙胺溶于无水二氯甲烷中，冰浴下滴加溶有丙烯酰氯的无水二氯甲烷溶液，升至室温搅拌过夜，纯化得到化合物3，

(4)将谷胱甘肽和碳酸氢钠溶于去离子水中，在N₂保护下逐滴滴加溶有化合物3的甲醇溶液，室温下搅拌反应24h，待反应结束后，将反应液倾入去离子水中，并用二氯甲烷萃取、硅胶柱层析纯化得到本发明公开的近红外比率型荧光探针。

3.根据权利要求2所述的一种近红外比率型荧光探针的合成方法，其特征在于，所述步骤(1)中，吲哚季铵盐和(2-氯-3-(羟甲基)环己基)甲醇的摩尔比为(1～3):1，所用溶剂正丁醇/苯的体积比为(6～8):(2～4)。

4.根据权利要求2所述的一种近红外比率型荧光探针的合成方法，其特征在于，所述步骤(2)中，化合物1与乙酸钠的摩尔比为1:(2～4)，所用溶剂N,N-二甲基甲酰胺的体积为5～7mL。

5.根据权利要求2所述的一种近红外比率型荧光探针的合成方法，其特征在于，所述步骤(3)中，化合物2、三乙胺和丙烯酰氯的摩尔比为1:(5～6):(2～3)，所述无水二氯甲烷的体积为20～30mL。

6.根据权利要求2所述的一种近红外比率型荧光探针的合成方法，其特征在于，所述步骤(4)中，化合物3、谷胱甘肽和碳酸氢钠的摩尔比为1:(3～5):(5～6)，所用去离子水的体积为5～10mL，甲醇的体积为5～10mL。

7.一种如权利要求1所述的近红外比率型荧光探针或如权利要求2～权利要求6任一所述方法合成的近红外比率型荧光探针在检测γ-谷氨酰转肽酶中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述γ-谷氨酰转肽酶在以肝癌细胞为主癌细胞中过度表达。