[发明专利]一种蛋白质芯片板的制备方法在审
申请号: | 202010403050.X | 申请日: | 2020-05-13 |
公开(公告)号: | CN113668069A | 公开(公告)日: | 2021-11-19 |
发明(设计)人: | 田克恭;张继颖;彭伍平;张许科 | 申请(专利权)人: | 洛阳中科生物芯片技术有限公司 |
主分类号: | C40B50/18 | 分类号: | C40B50/18;G01N33/68 |
代理公司: | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人: | 韩登营;荣文英 |
地址: | 471003 河南省洛阳市中国(*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 芯片 制备 方法 | ||
1.一种蛋白质芯片板的制备方法,其中,所述制备方法包括:
步骤1)配制膜处理液,将纳米膜浸泡在所述膜处理液中,然后用纯化水冲洗、吹干;
步骤2)配制点样液,将蛋白质用所述点样液稀释后于所述纳米膜上进行点样,获得蛋白质芯片;
步骤3)将所述蛋白质芯片于温度23℃±2℃、湿度25%以下的条件下干燥;
步骤4)配制膜封闭液,用膜封闭液对所述蛋白质芯片进行封闭,获得蛋白质芯片板。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述步骤1)中所述膜处理液为含4%w/vEDC、2%w/v NHS、0.25%v/v~1%v/v DMSO的PBS溶液,临用前加入0.1%v/v DCC混匀,所述PBS溶液为pH值5.5的PBS溶液;优选地,所述步骤1)中所述膜处理液为4%w/v EDC、2%w/v NHS、0.5%v/v DMSO的PBS溶液,临用前加入0.1%v/v DCC混匀;优选地DMSO含量选自0.25%v/v、0.30%v/v、0.35%v/v、0.40%v/v、0.45%v/v、0.50%v/v、0.55%v/v、0.60%v/v、0.65%v/v、0.70%v/v、0.75%v/v、0.80%v/v、0.85%v/v、0.90%v/v、0.95%v/v、1%v/v。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述步骤1)中,将所述纳米膜浸泡在所述膜处理液中30-60分钟,优选50分钟。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述步骤2)中,所述蛋白质包括猪伪狂犬病病毒gDgE蛋白、霉菌毒素抗原、禽用抗生素抗原、轮状病毒抗体。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述步骤3)中将所述蛋白质芯片于温度23℃±2℃、湿度25%以下的条件下干燥6-8小时,优选6小时。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其中,所述步骤4)中所述膜封闭液为含BSA、甘油、Tween-20的PBS溶液,所述PBS溶液为pH值7.4的PBS溶液;优选地,所述膜封闭液为含1%w/vBSA、0.1%~0.5%v/v甘油、0.1%v/v Tween-20的PBS溶液。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其中,所述甘油含量选自0.10%v/v、0.11%v/v、0.12%v/v、0.13%v/v、0.14%v/v、0.15%v/v、0.16%v/v、0.17%v/v、0.18%v/v、0.19%v/v、0.20%v/v、0.21%v/v、0.22%v/v、0.23%v/v、0.24%v/v、0.25%v/v、0.26%v/v、0.27%v/v、0.28%v/v、0.29%v/v、0.30%v/v、0.31%v/v、0.32%v/v、0.33%v/v、0.34%v/v、0.35%v/v、0.36%v/v、0.37%v/v、0.38%v/v、0.39%v/v、0.40%v/v、0.41%v/v、0.42%v/v、0.43%v/v、0.44%v/v、0.45%v/v、0.46%v/v、0.47%v/v、0.48%v/v、0.49%v/v、0.50%v/v。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的制备方法制备的蛋白质芯片板。
9.一种用于蛋白质芯片板的膜处理液,其中,所述膜处理液为含4%w/v EDC、2%w/vNHS、0.25%v/v~1%v/v DMSO的PBS溶液,临用前加入0.1%v/v DCC混匀,所述PBS溶液为pH值5.5的PBS溶液;优选地,所述膜处理液为4%w/v EDC、2%w/v NHS、0.5%v/v DMSO的PBS溶液,临用前加入0.1%v/v DCC混匀。
10.一种用于蛋白质芯片板的膜封闭液,其中,所述膜封闭液为含BSA、甘油、Tween-20的PBS溶液,所述PBS溶液为pH值7.4的PBS溶液;优选地,所述膜封闭液为含1%W/V BSA、0.1%~0.5%V/V甘油、0.1%V/V Tween-20的PBS溶液。
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