[发明专利]COVID-19潜在治疗药物代谢物的检测方法

说明书

本发明提供了一种COVID‑19潜在治疗药物代谢物的检测方法，其包括下列步骤：采用液相色谱‑质谱联用法，对经处理的食蟹猴血浆中的COVID‑19潜在治疗药物代谢物进行分析检测；其中，所述COVID‑19潜在治疗药物代谢物为(2R,3R,4S,5R)‑2‑(4‑氨基吡咯并[2,1‑f][1,2,4]三嗪‑7‑基)‑3,4‑二羟基‑5‑(羟甲基)四氢呋喃‑2‑甲腈；所述的经处理的食蟹猴血浆为经蛋白沉淀法处理的食蟹猴血浆；所述的蛋白沉淀法中的蛋白沉淀剂为甲醇。本发明能够快速、简便地检测食蟹猴血浆中COVID‑19潜在治疗药物代谢物。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种COVID-19潜在治疗药物代谢物的检测方法。

背景技术

2019年末，由2019新型冠状病毒(2019-nCoV)感染导致的新型冠状病毒肺炎(Novel coronavirus pneumonia，COVID-19)疫情暴发。该病毒传播迅速，传染性强，人群普遍易感，疫情很快成为全球关注的焦点。然而在全球范围内，尚无批准的针对COVID-19的治疗方法，抗新冠病毒药物的研发迫在眉睫。

瑞德西韦(remdesivir，RDV，GS5734)是由美国吉利德科学公司研发的一种抗病毒药物，最初设计用于治疗埃博拉病毒引发的出血热等疾病，由于其在体内外表现出了良好的广谱抗病毒作用而受到社会关注。

研究表明，作为一种核苷类似物，RDV通过宿主活性细胞代谢为具有药理活性的三磷酸代谢物后，竞争性抑制天然核苷三磷酸(NTP)加入病毒RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)，阻止病毒RNA合成以抑制病毒复制。因此，大多COVID-19潜在治疗药物是通过代谢物的作用使其具有药理活性，在研究COVID-19潜在治疗药物的血药浓度变化的同时，对其代谢物的血药浓度检测也尤为重要。

近年来随着科研工作者对新药安全评价方法的深入研究，色谱法已经广泛应用于大量的小分子药物代谢检测中，方法开发过程中主要对所使用的溶剂和试剂、基质以及配制和处理步骤进行筛选，从而形成精确测定的方法。因此，COVID-19潜在治疗药物代谢物的检测方法的开发至关重要。

发明内容

本发明提供一种COVID-19潜在治疗药物代谢物的检测方法。本发明的方法能够快速、简便地检测食蟹猴血浆中COVID-19潜在治疗药物代谢物。

本发明提供了一种COVID-19潜在治疗药物代谢物的检测方法，其包括下列步骤：

采用液相色谱-质谱联用法，对经处理的食蟹猴血浆中的COVID-19潜在治疗药物代谢物进行分析检测；其中，所述COVID-19潜在治疗药物代谢物为(2R,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-甲腈；

所述的经处理的食蟹猴血浆为经蛋白沉淀法处理的食蟹猴血浆；所述的蛋白沉淀法中的蛋白沉淀剂为甲醇。

本发明中，所述食蟹猴血浆是指未经处理的食蟹猴血浆；经过处理的食蟹猴血浆成为经处理的食蟹猴血浆。

较佳地，所述的食蟹猴血浆是食蟹猴EDTA-K₂血浆。

较佳地，所述的液相色谱-质谱联用法为LC-MS/MS方法。

较佳地，所述的液相色谱-质谱联用法中的进样量为1～10μL，优选2μL。

较佳地，所述的液相色谱-质谱联用法中柱温为20℃～30℃，优选25℃。

较佳地，所述的液相色谱-质谱联用法中采用梯度洗脱，所述的梯度洗脱中流动相A为体积浓度为0.01％～0.5％的甲酸水溶液，流动相B为甲醇。在一个具体的实例中，流动相A为浓度为体积浓度为0.1％的甲酸水溶液。