[发明专利]一种基于匹拉米洞法的动物粪潜血检测方法

说明书

一种基于匹拉米洞法的动物粪潜血检测方法，其包括以下预处理步骤：将粪便样品加入相对用量为(0.2‑1.0)g:1mL的去离子水充分搅拌混匀，离心后取上清。本发明的检测方法敏感性高，即使很小的出血量(1μg/mL)也能被检测出，操作简单方便，适用于实验动物的粪潜血的检测。

技术领域

本发明涉及动物医学检测领域，具体地，是一种粪潜血替代检测方法，更具体地，是一种基于匹拉米洞法的动物粪潜血检测方法。

背景技术

实验室一直采用实验室自行配置15％的邻甲苯胺冰醋酸溶液，与3％过氧化氢溶液进行粪便隐血检测。配置所用的邻甲苯胺易燃，遇明火、高温，燃烧,释放出有毒的烟雾及氨等有毒气体。其蒸汽与空气能形成爆炸混合物；有毒，对皮肤、眼睛、粘膜有刺激作用。与眼和皮肤接触后会引起眼睛灼伤和皮炎。摄入、吸入其蒸气或经皮肤吸收都会引起中毒。可生成高铁血红蛋白，引起神经障碍的作用很强，有头痛、发绀、无力、眩晕、倦睡。并能直接刺激膀胱，引起严重的膀胱炎、膀胱出血和血尿，且存在致癌性。实验室并不设有防爆设施，且安全防护不完善，为保障员工的人身安全，应对此种检测方法予以替换，防止意外发生。为替换实验室原有的粪潜血检测方法(邻甲苯胺法)，结合市面上已有的匹拉米洞试纸检测法，用自配制的匹拉米洞试剂测定粪便中的血红蛋白量，敏感度大大提高。

现有动物粪潜血检测方法主要以化学法为主，如邻联苯胺法、联苯胺法和愈创木酯法均有用于动物粪潜血检测的报道，但采用上述方法，均存在检测结果敏感性低的情况。而现有的邻甲苯胺和匹拉米洞试纸检测法灵敏度分别在100μg/mL和10μg/mL左右。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的动物粪潜血检测结果敏感性低的问题，提供一种基于匹拉米洞法的动物粪潜血检测方法，基于现有的匹拉米洞法，对实验动物进行粪潜血替代检测，操作简单方便，敏感性高。

本发明涉及一种基于匹拉米洞法的动物粪潜血检测方法，还包括以下预处理步骤：

将粪便样品加入去离子水充分搅拌混匀，离心后取上清；

其中：所述的粪便样品与所述的去离子水的相对用量为(0.2-1.0)g:1mL。例如，当粪便样品的质量为0.5g时，加入去离子水1mL。

本发明中所述的匹拉米洞法即为本领域常规使用的匹拉米洞法。

本发明中，所述的粪便样品来源为动物，较佳地，为本领域常用实验动物，例如食蟹猴、比格犬和SD大鼠。

所述的粪便样品的质量为0.2-0.5g；较佳地，为0.5g。

所述的去离子水的体积为0.5-1mL，较佳地，为1mL。

所述的离心为4000rpm 15分钟。

所述的匹拉米洞试剂可为本领域常规，其包含匹拉米洞乙醇溶液、冰醋酸和过氧化氢。

其中，所述的匹拉米洞乙醇溶液中匹拉米洞的浓度可为本领域常规，较佳地为0.15-0.2g/mL；更佳地为0.2g/mL。

其中，所述的过氧化氢的浓度可为本领域常规，例如为3％。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：

现有的邻甲苯胺和匹拉米洞试纸检测法灵敏度分别在100μg/mL和10μg/mL左右，而使用本发明的检测方法，即使很小的出血量(1μg/mL)也能被检测出，克服了目前市面上其他半定量粪潜血检测方法灵敏度低的局限。

附图说明

图1为实施例1食蟹猴对照组粪潜血检测结果示意图。