[发明专利]一种海参皂甙的提取方法

说明书

本发明公开了一种海参皂甙的提取方法，属于海洋生物技术领域。本发明以海参深加工废弃物海参内脏为原料，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术、乙醇沉淀和树脂吸附技术，研制开发出高体外抗氧化能力和抗癌功效的海参皂甙生物制品，其中混菌好氧发酵菌种主要包括酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌。所得海参皂甙具有较强的抗氧化能力和抗癌功能，光谱性强，可在保健、食品、医药等领域高效利用。该提取方法海参皂甙提取率高，能够实现海参加工废弃物的资源化再利用，便于工业化生产，市场前景广阔。

技术领域

本发明涉及一种海参皂甙的提取方法，尤其是一种利用海参内脏为原料通过微生物协同发酵制备高抗氧化能力和营养保健功效的海参皂甙生物制品，属于海洋生物技术领域。

背景技术

海参是一种重要的海洋无脊椎动物，肉质细嫩、营养丰富，是典型的高蛋白、低脂肪的食物，具有极高的营养价值和药用价值， 对于高血压、冠心病、肝炎等患者以及老年人而言是食疗佳品，它既可以增强机体的免疫力和造血功能，又可抑制多种霉菌及人类癌细胞的生长和转移等。早在一千多年前，我国就有食用海参的习惯，并将海参视为一种珍贵的滋补品，列为“海八珍”之首。《本草从新》中记载海参具有“甘、咸、温、补肾益精、壮阳疗痿”的功效，清朝《本草纲目拾遗》中记载“海参性温补，足敌人参故名海参； 味甘咸、补肾经、益精髓、消痰延、摄小便、壮阳疗痿、杀疮虫”。

近年来研究发现海参中的主要活性成分为其次生代谢产物一一海参皂甙，海参皂甙在海参体壁真皮结缔组织、体腔、内腺管及内脏中均有分布，具有多种药理活性活性，如抗肿瘤作用、提高免疫力、抗新血管形成、抗凝血、促进纤维蛋白溶解、抑制栓塞形成、抗炎作用（如关节炎）和抗放射活性，以及抑制艾滋病病毒、乙肝病毒、单纯坝疹病毒等:另外，研究还发现海参皂甙具有广谱的抗真菌功效。目前，己有很多国家的科研机构致力于以海参皂甙为主的产品的研发。由于加工成果中皂甙多残留于加工废液中，对加工废弃物的资源化再利用提取海参皂甙研究较少，已造成资源严重浪费和流失。

现有技术中，海参皂甙的制备工艺主要集中于有机溶剂萃取法，如专利CN2005100441221公开了一种利用海参加工废液制备海参皂甙的工艺方法，首先将海参废液进行过滤，然后滤液用乙醇沉淀、静置、离心，再将离心上清液减压浓缩，最后通过大孔吸附树脂柱制备海参皂甙。比较现有技术发现海参皂甙提取率低、生产成本高，难以实现产业化生产，尤其是对于提高海参皂甙的抗氧化性及营养功效及定向制备技术的研究相对较少，成为制约海参皂甙规模化利用的最大技术瓶颈。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，满足海参加工废弃物高效提取及高值化利用，本申请提供一种海参皂甙的提取方法，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，研制开发出高体外抗氧化能力的海参皂甙生物制品，满足保健、医疗、食品等领域对海参皂甙的应用需求，该工艺技术发酵工艺简单高效、所得产品抗氧化能力和自由基清除能力强，生产成本低，易于工业化规模生产。

本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：

一种海参皂甙的提取方法，其特征在于制备方法包括如下步骤：

（1）清洗：将加工的新鲜海参内脏用自来水清洗干净，再用天然矿泉水或纯化水洗净沥干待用；

（2）匀浆：将步骤(1)所得海参内脏加入高速匀浆机，加入天然矿泉水或纯化水，进行高速匀浆，直至全部能够通过2mm孔径圆筛；

（3）灭菌：将匀浆后的海参内脏通过高压蒸锅灭菌，冷却后待用；

（4）复合酶解：向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂，在40～60℃条件下搅拌酶解30min；

（5）好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵8h；

（6）厌氧发酵：好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵12h；