[发明专利]基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法

权利要求书

1.一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，所述抗生素为磺胺类抗生素；

具体包括以下步骤：

1)合成Fe₃O₄-MWCNTs磁性纳米复合材料

氮气保护下，将MWCNTs分散在超纯水中，加入FeCl₃和FeCl₂，加入碱溶液调pH至11-13，制备得到Fe₃O₄-MWCNTs复合材料，备用；

2)待检测畜禽粪便样品前处理

采集畜禽粪便样品并进行冻干、粉碎、过筛处理，称取畜禽粪便样品，加入萃取溶液，涡旋，超声处理；随后加入Na₂SO₄和NaCl，涡旋混合，超声处理，离心，得上清液；所述萃取溶液为1％甲酸水和乙腈的混合溶液；

3)磁固相萃取

将步骤2)的上清液中加入吸附剂Fe₃O₄-MWCNTs磁性纳米复合材料，震荡，然后通过外部磁体将吸附剂快速从溶液中分离出来，净化后的上清液有机滤膜过滤，得待测样品；

4)待测样品采用UPLC-MS/MS进行定性和定量分析

色谱柱为ACQUITY HSS T3色谱柱；流动相A为0.1％的甲酸水，流动相B为甲醇；采用梯度洗脱。

2.如权利要求1所述的一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，色谱分析条件：进样体积为2μL；流速为0.3mL/min；柱温为30℃；梯度洗脱条件如下表：

。

3.如权利要求1所述的一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，质谱分析条件为：AB5500三重四极杆串联质谱仪，ESI源以正数ESI+操作，并以多反应监测MRM模式获得光谱；参数设置如下：离子喷雾电压为4.5Kv，气帘气压力为15psi，雾化气压力为13psi，辅助加热器压力为13psi；离子源温度为550℃。

4.如权利要求1-3中任一项所述的一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，所述抗生素为15种磺胺类抗生素，具体为：磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺喹噁啉、磺胺噻唑、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺吡啶、磺胺醋酰、磺胺甲基嘧啶、磺胺氯哒嗪、苯甲酰磺胺、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺二甲基噁唑。

5.如权利要求4所述的一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，所述步骤1)中合成Fe₃O₄-MWCNTs磁性纳米复合材料具体为：首先将0.60gMWCNTs分散在500mL超纯水中，超声处理1小时，然后在60℃下搅拌30min后，加入0.9gFeCl₃·6H₂O和0.35g FeCl₂·4H₂O，继续搅拌30min后，缓慢加入NaOH水溶液将反应混合物pH调节至12，并保持2小时以上，整个制备过程在氮气保护下进行；最后，通过外部磁体收集制备好的Fe₃O₄-MWCNTs复合材料，用超纯水洗涤3次，在真空下冷冻干燥备用。

6.如权利要求4所述的一种基于磁性纳米复合材料检测畜禽粪便中多种抗生素的方法，其特征是，所述步骤2)中待检测畜禽粪便样品前处理具体为：采集畜禽粪便样品并进行冻干、粉碎、过筛处理，称取2.0g样品于50mL聚丙烯离心管中，加入20mL萃取溶液，涡旋1min，超声处理20min；随后加入4g Na₂SO₄和1g NaCl，涡旋混合1min，超声处理10min后，离心5min，静置30min；萃取溶液为1％甲酸水：乙腈V：V＝2：8。