[发明专利]从葛花中分离制备一种黄酮类化合物的方法

说明书

本发明公开了从葛花中分离制备一种黄酮类化合物的方法，属于植物天然产物制备方法领域。所述黄酮类化合物为3'‑羟基鸢尾黄素‑7‑O‑β‑D‑木糖基‑(1→6)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷。本发明制备方法使用氧化锆为分离介质，经合成氧化锆、制备葛花粗提液、氧化锆吸附、蒸馏水洗涤和醋酸脱附等步骤，分离得到所述黄酮类化合物。所述黄酮类化合物的纯度达90%以上，得率为0.6%左右。本发明的制备方法除醋酸和乙酸乙酯外，再未使用其他有机溶剂，是一种环境友好型的分离方法；本发明的分离制备方法工艺简单，无需投入昂贵的生产设施、产品成本低，适于工业化生产。

技术领域

本发明属于植物天然产物制备方法领域，具体为从葛花中分离一种具体黄酮类化合物的方法。

背景技术

葛花是一种重要的中草药，具有解酒醒脾等功效，主要用于治疗伤酒发热烦渴、呕逆吐酸及不思饮食等症状。近年来，研究表明葛花还具有抗肿瘤和抗中风等功能。葛花中的黄酮类化合物是其发挥各种功能的基础，包括葛花苷、尼泊尔鸢尾素、鸢尾苷、鸢尾异黄酮和染料木苷等。除了这些常见的已知成分，最近还从葛花中分离出了一些新的黄酮类化合物，例如3'-羟基鸢尾黄素-7-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷（其结构如下图所示）。该化合物具有显著的抗氧化活性（Yilong Ma et.al, A new isoflavone glycosidefrom flowers of Pueraria montana var. lobata (Willd.) Sanjappa Pradeep,Natural Product Research, 2019, Online）；此外，由于是鸢尾黄素的衍生物，因此在抗肿瘤、抗中风等方面也将发挥重要作用。

葛花中的黄酮类化合物通常使用高效液相色谱（HPLC）或硅胶色谱的方法进行分离，但由于葛花提取物中黄酮类化合物的成分复杂，并且与多糖、蛋白质等组分混合在一起，因此，很难对葛花提取物中的具体黄酮类化合物进行分离。组合使用传统的硅胶色谱法和HPLC，通过多次重复纯化，虽然可以对葛花提取物中的具体黄酮类化合物进行分离，但是分离过程费时费力，并且很难用于具体黄酮类化合物的规模化分离，进而制约了其在医药等领域的应用。此外，3'-羟基鸢尾黄素-7-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷是葛花中的一种新型的黄酮类化合物，尚无研究对其具体的分离方法进行报道。

发明内容

为了实现操作简单的分离制备纯度高的3'-羟基鸢尾黄素-7-O-β-D-木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，本发明提供从葛花中分离制备一种黄酮类化合物的方法。

从葛花中分离制备一种黄酮类化合物的操作步骤如下：

（1）合成氧化锆

向浓度0.2～0.5 mol/L氧氯化锆（ZrOCl₂·8H₂O）/去离子水溶液中缓慢滴加浓氨水至pH为10；继续搅拌1小时，得到白色沉淀；将白色沉淀经去离子水洗涤至pH=7、烘箱110℃烘干、马弗炉煅烧，得到氧化锆；所述氧化锆为单斜晶系和立方相的混合物，其红外光谱数据KBr为：500-850 cm^-1，1200-1460 cm^-1，1460-1680cm^-1；

（2）制备葛花粗提液

将新鲜葛花在60℃条件下干燥12小时，粉碎过60目筛，得到葛花粉末；按1g：10mL的比例向葛花粉末中加入去离子水，超声提取60~120 分钟，在转速5000rpm条件下离心5分钟，取上清液，上清液即葛花粗提液；

（3）氧化锆吸附