[发明专利]一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括抗生物素抗体包被的酶标板、生物素标记的白介素20单克隆抗体溶液、辣根过氧化物酶标记的白介素20单克隆抗体溶液、清洗液、底物液、待检测标准品溶液。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述酶标板包被的抗生物素抗体包被浓度为2.2-5.6μg/ml，其中包被酶标板的制备步骤如下：

1)将抗生物素抗体加入稀释液进行稀释；

2)然后将稀释之后的抗生物素抗体溶液加入到酶标板表面的微孔中，再将酶标板表面的微孔中加入封闭液；

3)将加入抗生物素抗体溶液的酶标板在低温下过夜；

4)取出酶标板，使用清洗液将其进行洗涤，除去未结合的游离成分，即得抗生物素抗体包被的酶标板。

3.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述生物素标记的白介素20单克隆抗体溶液的浓度为1.2-7.6μg/ml，其中生物素标记的白介素20抗体溶液为白介素20抗体以生物素反应溶液稀释而成。

4.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述辣根过氧化物酶标记的白介素20单克隆抗体溶液的浓度为0.8-6.5μg/ml，其中辣根过氧化物酶标记的白介素20抗体溶液的制备步骤如下：

1)将辣根过氧化物酶与白介素20抗体偶联；

2)往上述偶联产物中加入酶反应物稀释液进行稀释，得到辣根过氧化物酶标记的白介素20抗体溶液。

5.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述清洗液为PBS溶液与质量浓度为0.05％的吐温20组成，其中吐温20占清洗液质量的0.1％。

6.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述底物液为过氧化氢溶液与鲁米诺溶液配置而成。

7.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的酶联免疫试剂盒，其特征在于：所述待检测标准品溶液的制备步骤如下：

1)采集微量血；

2)往稀释后血液加入稀释后血液体积1/3的淋巴细胞分离液，自然沉淀十分钟；

3)在1500-2500rpm的条件下离心，吸出白色的细胞层，然后在4500-5500rpm的条件下离心10s，弃去上清液，沉淀为白细胞；

4)从白细胞中分离出白介素20，将白介素20中加入pH值7.4的磷酸缓冲液进行稀释，即得待检测标准品溶液。