[发明专利]一种野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法

说明书

本发明公开了一种野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法。通过菌株分离、母种培养基筛选、培养条件筛选和代料培养基筛选实验，最终以PDA+棉籽壳粉培养基和PDA+麦草粉作为母种培养基，野生稠李蘑菇菌丝体生长速度最佳，分别为2.86 mm/d和3.08 mm/d，菌丝长势亦较强，显著优于其他种类培养基；同时筛选出满足要求的代料培养基2种，完全可以满足开展生物学研究的要求。本发明提供的野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法不仅解决了野生稠李蘑菇菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基上生长缓慢，菌丝长势弱，不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究的技术问题，而且为野生稠李蘑菇菌种开展人工驯化栽培奠定了技术基础。

技术领域

本发明涉及食用真菌技术领域，本发明具体涉及一种野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法的技术领域。

背景技术

食用菌普遍富含蛋白质、多糖和维生素，而脂肪含量低，通常具有提高人体免疫力、改善人体机能、治疗心血管疾病的生理功效，被誉为21世纪的健康食品。随着人民生活水平的提高，人们对新型食用菌品种的需求逐渐增大，因此，新的野生食用菌品种开发成为形势发展的需要。

稠李蘑菇(Agaricuspadanus)是近年在我国新发现的食用菌物种之一，隶属于担子菌门，蘑菇纲，蘑菇目，蘑菇科，蘑菇属(Agaricus)，据文献报道，目前该野生资源仅在中国和意大利有分布，在中国，野生稠李蘑菇仅发现于新疆，是新疆部分地区农牧民经常食用的特色食用菌之一，主要生长于荒漠草原上，常埋在土壤里，一般不露出地面。野生稠李蘑菇子实体中大型，风味独特，营养丰富，鲜食和制干均可，深受当地各族群众喜爱，但目前还未见人工驯化栽培成功的文献报道，因此，野生稠李蘑菇具有很大的驯化栽培前景和科研价值。前期研究发现，野生稠李蘑菇菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上生长缓慢，菌丝长势弱，其菌丝体培养物既难以满足开展生物学研究的要求，也不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究，因此，亟待开发野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法。

发明内容

针对野生稠李蘑菇菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上生长缓慢，菌丝长势弱，其菌丝体培养物既难以满足开展生物学研究的要求，也不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究的技术现状，本发明旨在于提供一种野生稠李蘑菇菌种分离培养方法。通过菌种分离、母种培养基筛选、培养条件筛选和代料培养基筛选实验，最终形成野生稠李蘑菇菌种的菌种分离与培养方法，利用该分离培养方法培养的稠李蘑菇菌丝体长速较快，菌丝长势较强，完全可以满足开展生物学研究的要求，利用该方法培养的稠李蘑菇菌种也便于开展人工驯化栽培研究，为其奠定了技术基础。

为了达到以上技术目的，本发明采用的技术方案是：一种野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法，具体包括以下步骤：

(1)按照下述配方制备培养基，按照重量分数计，培养基包括：马铃薯160-240g，葡萄糖15-25g，棉籽壳粉30-70g，琼脂粉15-25g，蒸馏水800-1200mL，所述培养基用棉籽壳粉可换为麦草粉；

(2)在野生稠李蘑菇分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体；

(3)用刷子将子实体表面杂质清理干净，在无菌条件下，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒；

(4)将接种好的菌种放置于22-28℃生化培养箱暗培养，待菌丝体长好后，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22-28℃培养12d、菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生稠李蘑菇菌种母种。