[发明专利]一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒

说明书

本发明提供一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，涉及化学发光检测技术领域。该用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ‑21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ‑21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。本发明中，使得微量血的血小板检测方式成本较低、减少了设备使用且设备操作简单、省时省力，检测过程中其灵敏度和抗干扰能力得到了明显提升，大大减少了现有技术中的弊端，能够适应对灵敏度的要求，实用性较强。

技术领域

本发明涉及化学发光检测技术领域，具体为一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒。

背景技术

化学发光又称为冷光，是由化学反应而产生的光辐射，化学发光分析是一种新型的分析方法，具有极高的灵敏度、选择性较好、仪器简单、分析速度快、线性范围可宽达几个数量级等优点。在环境、生命、医学等领域得到愈来愈广泛的应用，化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。

化学发光杂交检测，是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法，酶标记抗体取代了放射性标记抗体，当它作用于底物时，可产生光信号，多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)二级抗体耦联物为基础，信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采集，化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史，大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测，目前，基于微量血的血小板检测方式成本高、设备操作复杂、费时费力，检测过程中其灵敏度和抗干扰能力严重不足，存在很大的弊端，已无法适应对灵敏度的要求，有待进一步优化。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，解决了现有技术中存在的缺陷与不足。

(二)技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。

优选的，所述待检测标准品溶液的制备步骤如下：

1)采集微量血；

2)将采集的微量血置于抗凝离心管中，静置25-35min后离心处理，700-900rpm离心8-12min，取上清液；

3)将上清液吸出并置于干净试管中，3000-4000rpm离心8-12min，弃去上清液，得到沉淀物即为血小板；

4)将上述得到的血小板中加入pH值7.4的磷酸缓冲液进行稀释，即得待检测标准品溶液。

优选的，所述浓缩清洗液为磷酸盐缓冲溶液与质量浓度为0.05％的吐温20组成，其中吐温20占浓缩清洗液质量的0.08-0.12％。

优选的，所述膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为0.8-6.5μg/ml，其中膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液为膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21与pH值7.4的磷酸缓冲液稀释而成。

优选的，所述微孔板包被的抗膜糖蛋白单克隆抗体包被浓度为1-7μg/ml，其中包被微孔板的制备步骤如下：

1)将抗膜糖蛋白单克隆抗体加入稀释液进行稀释，其中稀释液为pH值7.4的磷酸缓冲液；

2)然后将稀释之后的抗膜糖蛋白单克隆抗体溶液加入到微孔板表面的微孔中，再将微孔板表面的微孔中加入封闭液；