[发明专利]泰乐菌素和替米考星快速荧光检测试剂及应用

说明书

本发明涉及泰乐菌素和替米考星快速荧光检测试剂及应用。将具有相同材料内核及不同发射波长的两种量子点分别与泰乐菌素和替米考星的适配体Ty4和Ti2组装为泰乐菌素和替米考星的复合荧光探针QD1‑Ty4和QD2‑Ti2，将羧基化磁珠分别与泰乐菌素和替米考星的适配体互补序列CTy4和CTi2组装为复合物CTy4‑MB和CTi2‑MB，通过将两种复合荧光探针分别与两种复合物对应组装，可制备出泰乐菌素快速荧光检测试剂和替米考星快速荧光检测试剂。本发明可以不依赖于分离分析技术即实现对牛奶样品中泰乐菌素和替米考星多残留的快速、准确和灵敏检测，为强化食品安全监管提供了强有力的技术保障。

技术领域

本发明涉及纳米材料制备技术领域和兽药残留检测技术领域，具体涉及综合适配体高特异性和量子点优异荧光特性，可分别选择性标记泰乐菌素和替米考星的两种快速荧光检测试剂，并将其应用于泰乐菌素和替米考星多残留同时检测。

背景技术

泰乐菌素和替米考星是在畜牧业中广泛使用的两种大环内酯类抗生素，过量使用、违反禁药期等应用方式可造成其在动物源性食品中的残留，长期摄入此类食品会导致心肾毒性、过敏反应和耐药菌群产生等健康风险。对可能的多种抗生素残留超标食品进行准确甄别是食品安全防护的最后一道关口，而在一次检测中既能明确残留抗生素具体名称，又能进行准确定量的多残留检测方法则是这其中的可靠技术保证。在多残留检测中，对同类抗生素(例如大环内酯类抗生素)的多残留进行检测是技术难度最大的。

目前能够对大环内酯类抗生素多残留进行准确定性和灵敏定量的方法主要是分离分析方法，例如高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法。这类方法需要昂贵的仪器和专业操作人员，还要对被测样品进行复杂耗时的净化前处理，不能现场快速检测，这些都成为制约快速有效市场监管的瓶颈。荧光检测法十分灵敏，极适合抗生素残留检测，然而泰乐菌素和替米考星结构中不具有荧光团，必须在荧光标记后才能使用该方法。普通荧光染料在对同类抗生素进行标记时并无对其中某个具体抗生素的特异识别能力，在标记后的多残留检测中仍然要借助于分离分析技术。近年来在分析化学领域广泛应用的纳米荧光材料量子点虽然具有普通荧光染料没有的优越荧光特性，但其同样不能特异性识别被标记物，往往与只能进行单一残留检测的免疫法结合起来使用，不能实现高选择性的多残留检测。

发明内容

本发明的目的在于提供可高特异性识别和感知泰乐菌素和替米考星的两种快速荧光检测试剂的制备方法，以及将试剂用于动物源性食品中该两种抗生素多残留同时检测的使用方法，摆脱多残留检测对分离分析技术的依赖。

具体步骤如下：

1、泰乐菌素和替米考星快速荧光检测试剂，其特征在于：所述试剂采用如下方法进行制备：

将具有相同材料内核及不同发射波长的两种量子点QD1和QD2分别与泰乐菌素和替米考星的适配体Ty4和Ti2组装为泰乐菌素复合荧光探针QD1-Ty4和替米考星复合荧光探针QD2-Ti2；将羧基化磁珠(MB)分别与泰乐菌素和替米考星的适配体互补序列CTy4和CTi2组装为复合物CTy4-MB和CTi2-MB；将两种复合荧光探针分别与两种复合物对应组装为泰乐菌素快速荧光检测试剂QD1-Ty4-CTy4-MB和替米考星快速荧光检测试剂QD2-Ti2-CTi2-MB；所述量子点QD1和QD2分别是以巯基乙酸和巯基丙酸修饰的CdTe量子点，激发波长370nm，发射波长分别为548和630nm。

具体步骤如下：