[发明专利]一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥及其制备方法

权利要求书

1.一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：它包括功能菌种发酵液和生物有机肥，所述功能菌种发酵液的添加比例为总重量份数的0.1％～0.3％；

所述功能菌种发酵液由贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌发酵液组成，所述贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌发酵液的体积比为：0.5～1.5:0.5～1.5；

所述贝莱斯芽孢杆菌的保藏登记号为CGMCC No.19513；

所述解淀粉芽孢杆菌的保藏登记号为CGMCC No.19514。

2.根据权利要求1所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：其制备方法包括以下步骤，

步骤一，将生物有机肥发酵腐熟；

步骤二，功能菌种的添加，生物有机肥发酵完成后，将功能菌种发酵液添加到肥料中，混合均匀，备用；

步骤三，将步骤二中混合物筛分、包装后，即得生物有机肥成品。

3.根据权利要求2所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述步骤一中的生物有机肥的发酵腐熟的工艺包括以下步骤：

第一步，有机肥料的发酵，按照重量份数计，称取粉状或片状的菜籽枯750-1000份、菊花渣0-100份、活化腐植酸0-150份、腐熟剂2-5份均匀混合后，发酵物料的C/N为25-30:1，调节物料水份为45％-55％之间，pH为6.5-7.5之间，将物料堆码发酵，发酵温度至55℃开始翻堆，控制发酵温度为55-65℃，发酵时间为15-18天，即得发酵好的有机肥料；

第二步，有机肥料的后熟，将第一步中发酵好的有机肥料转移到后熟车间，在通风静置的条件下进行10-15天的后熟。

4.根据权利要求2所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述步骤二中的功能菌种发酵液的制备方法包括以下步骤，

第一步，菌种活化，将-80℃下保存的贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌在LB固体培养基上分别进行活化，采用划线培养的方式，于34～37℃条件下培养24～48h，挑取单菌落在LB固体培养基上继续进行划线培养，在34～37℃条件下培养24～48h，得活化的菌株；

第二步，种子液制备，用无菌接种环刮取一环第一步中活化的菌株分别接种到50ml LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm条件下培养24h，得两株菌株的种子液；

第三步，发酵液制备，按照菌种种子液、培养液体积比为1：120的比例将第二步所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为36.5℃～37.5℃，转速为120rpm/min条件下分别培养25～30h，得发酵液，

步骤四，复合菌剂制备，将第三步中所得的发酵液中按照贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌体积比为0.5～1.5:0.5～1.5的比例进行混配，得到功能菌种发酵液。

5.根据权利要求4所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述第二步中LB液体培养基的组成成分及其配比为：细菌学蛋白胨10g，酵母提取粉5g，氯化钠10g，水1L，即得液体培养基。

6.根据权利要求4所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述第一步中LB固体培养基的组成成分及其配比为：细菌学蛋白胨10g，酵母提取粉5g，氯化钠10g，水1L，琼脂粉7.5g。

7.根据权利要求4所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述第三步中车间发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：黄豆粉1.0～1.6％、蔗糖0.1～0.5％、蛋白胨0.2～0.6％、玉米粉0.2～0.6％、碳酸钙0.3～0.9％、鱼粉0.1～0.3％、硫酸铵0.01～0.08％、硫酸镁0.02～0.05％、磷酸二氢钾0.01～0.04％、磷酸氢二钾0.02～0.05％、硫酸锰0.01～0.04％、氢氧化钠0.01～0.04％、氯化钠0.02～0.03％、消泡剂0.5～1.5％，所述车间发酵培养基用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8～7.5。

8.根据权利要求4所述的一种具有防治烟草土传病害功能的生物有机肥，其特征在于：所述步骤四中功能菌种发酵液的有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL。