[发明专利]一种三叶青种苗培育方法

权利要求书

1.一种三叶青种苗培育方法，包括如下步骤：

S1：外植体的准备：选取三叶青组进行培育，以茎尖带腋芽的茎段为外植体；

S2：外植体的处理：先将采集的三叶青茎段用柔软毛刷配合洗涤剂洗去表面尘土，再将其置于水龙头下以流水冲洗10～20min，然后在超净工作台上进行表面消毒；

S3：外植体的增殖培育：之后取出茎段，置于灭菌的培养皿中，用滤纸吸干表面水分，在超净工作台上，用灭菌的解剖刀、镊子将茎段均匀分成大小相同的小段，每段含1个腋芽，腋芽朝上，接种于事先准备好的诱导培养基中，每瓶50～100株；

S4：初代培育：待小段长成三叶青幼苗之后，将幼苗移入基本培养基中对幼苗进行初代培育，初代培育过程中，前期进行暗培育，待有芽萌发后，对其进行光照培育；

S5：重复培育：重复所述S1-S4，待组培苗株生长满瓶后，形成较多组培苗株；

S6：生根培育：获得较多组培苗株后进行生根培育，待组培苗株长高至2cm，将小苗剪枝处理，并更换基本培养基进行生根培育，并且通过换液装置每隔10天更换一次培养液；

S7：炼苗和移植：待苗株长高至5cm时将组培苗进行炼苗和移植。

2.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S1中，选取的三叶青组以无病虫害、无病毒侵染、生长健壮的当年生嫩枝加工外植体。

3.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S2中，具体的消毒方法是：将外植体茎段先放入75％的乙醇溶液中浸泡10～15s后，用无菌水洗净，再放入2％次氯酸钠溶液中消毒10～20min后，用无菌水冲洗3～6次。

4.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S3中，每小段大小为0.8～1.0cm，每个诱导培养基中培育80～100株。

5.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S3中，诱导培育温度为24～26℃，光照强度1000～1500lx，每天的光照时间为11～13h，诱导培养基为：MS+2.0～4.0mg/L浓度苄氨基腺嘌呤(6-BA)和0.1～0.4mg/L浓度的萘乙酸(NAA)。

6.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S4中，培育温度为24～26℃，光照强度1000～1500lx，每天的光照时间为11～13h，基本培养基为MS培养基。

7.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S6中，培育温度为24～26℃，光照强度1000～1500lx，每天的光照时间为11～13h，生根培养用基本培养基为：MS+1.0～1.5mg/L浓度的吲哚丁酸(IBA)。

8.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，在所述S6中，所述换液装置包括底座(1)，所述底座(1)的内侧壁对称安装有两个限位块(3)，两个限位块(3)上放置有培育箱(2)，所述培育箱(2)下方放置有灭菌箱(7)，所述灭菌箱(7)通过回液管(6)与培育箱(2)的底部相连通，所述灭菌箱(7)还通过进液管(9)与培育箱(2)的顶部相连通。

9.根据权利要求1所述的一种三叶青种苗培育方法，其特征在于，所述回液管(6)上安装有阀门(5)，所述进液管(9)上安装有水泵(8)，所述培育箱(2)的内侧壁开设有固定槽(4)，所述进液管(9)与固定槽(4)相连通。