[发明专利]一种用于修复土壤污染的环保生物菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种用于修复土壤污染的环保生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下制备步骤：

（1）将胆固醇与吡啶按质量比1:25混合与烧杯中，并向烧杯中加入胆固醇质量0.8倍的丁二酸酐，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应6h后，将烧杯内物料于温度为80℃，转速为120r/min，压力为600kPa的条件下旋蒸浓缩5h，得粗产品，将粗产品于质量分数为18%乙醇溶液中重结晶，得胆固醇-丁二酸酯，将胆固醇-丁二酸酯与三氯甲烷按质量比1:80混合于烧瓶中，并向烧瓶中加入胆固醇-丁二酸酯质量2倍的氯化亚砜溶液，于温度为70℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应4h后，将烧瓶内物料于温度为80℃，转速为120r/min，压力为600kPa的条件下旋蒸浓缩4h，得胆固醇-丁二酰氯混合液，将胆固醇-丁二酰氯混合液与葡聚糖按质量比1:3混合于三口烧瓶中，并向三口烧瓶中加入胆固醇-丁二酰氯质量200倍的二甲基亚砜和胆固醇-丁二酰氯质量5倍的乙二胺，向三口烧瓶中以30mL/min的速率通入氮气，于温度为80℃，转速为280r/min的条件下拌反应6h后，将三口烧瓶内物料于水中透析4h；

（2）将步骤（1）透析所得物质与聚乳酸按质量比1：1混合，并向步骤（1）透析所得物质与聚乳酸的混合物中加入聚乳酸质量5倍的二甲基亚砜，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应6h后，得聚乳酸混合物，将聚乳酸混合物于水中透析4h后，得透析产物，将透析产物与质量分数为6%的氯化钆溶液按质量比1：10混合，于室温条件下透析4h后，过滤，得改性聚乳酸，将改性聚乳酸与质量分数为5%的1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐溶液按质量比1：8混合，并向改性聚乳酸与1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐溶液的混合物中加入改性聚乳酸质量0.3倍的N-羟基琥珀酰亚胺，于室温条件下混合浸泡6h后，过滤，得滤饼，将滤饼于温度为60℃的条件下干燥3h；

（3）将壳聚糖与质量分数为2%的柠檬酸溶液按质量比1：15混合，并向壳聚糖与柠檬酸溶液的混合物中加入壳聚糖质量0.4倍的琼脂糖，于温度为45℃，转速为300r/min的条件下搅拌溶解50min后，得壳聚糖混合溶液，将壳聚糖混合溶液与步骤（2）所得物质按质量比8：1混合，于温度为38℃，转速为400r/min的条件下搅拌反应4h后，冷冻干燥，得坯料，将坯料与细菌培养液按质量比1：8混合于培养皿中，并向培养皿中加入坯料质量0.2倍的木醋杆菌和坯料质量0.02倍的木霉，于室温条件下混合培养3天后，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为32℃的条件下干燥24h；

（4）对步骤（3）所得物质进行指标分析。

2.根据权利要求1所述的一种用于修复土壤污染的环保生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述细菌培养液为将葡萄糖与水按质量比1:30混合，并加入葡萄糖质量0.2倍的蛋白胨，葡萄糖质量0.3倍的酵母粉，葡萄糖质量0.2倍的磷酸二氢钠和葡萄糖质量0.03倍的柠檬酸，搅拌混合，得细菌培养液。