[发明专利]一种装填自动喷胶层析柱的方法

说明书

本发明涉及一种装填自动喷胶层析柱的方法。本发明通过在胶面达到喷胶层析柱上筛板之前，即在胶面离上筛板一定距离时，手动停止装柱，使得装柱效果好，装柱频次减少，同时节约操作时间。

技术领域

本发明属于分离纯化领域，涉及一种层析柱的装填方法，更具体地，本发明涉及一种装填自动喷胶层析柱的方法。

背景技术

层析柱是一种广泛应用于单克隆抗体、重组蛋白和多肽等生物制品分离纯化的装置，又称色谱柱，其中自动喷胶层析柱是一种匹配了自动装柱器的层析柱。自动喷胶层析柱配备可升降柱头、阀门、驱动等功能模块，能够在不打开顶层流体槽的情况下实现自动装柱与卸柱，如Merck生产的ISO PAK型号层析柱、汉邦科技生产的SCC自动喷胶层析柱以及CN104307207A所述的层析柱等，具有操作简单，密封性能好，易于大尺寸柱床的装填等优点。

层析柱的装填效果是决定层析柱分离效率的关键因素，其通过直接影响流体在层析填料传送过程的传质效应，进而影响分离物的收率和质量等。目前，自动喷胶层析柱的装填多采用现行方法，其步骤包括：

1)层析柱清洁；

2)注射用水排尽层析柱内以及管路气泡，并充满层析柱柱床；

3)搅拌均匀的填料循环层析柱上部分管路，并充满管路；

4)调节自动装柱器的泵压力，将填料通过上阀和喷胶口泵入层析柱，注射用水从下连接口排出，实现填料置换柱内注射用水，至泵压力或位置达到要求时自动停止；

5)关闭上阀和下连接口；

6)柱效测试。

层析柱的装填效果，又称柱效，主要通过理论塔板数和不对称性(As)两个指标进行衡量。采用上述方法装填的层析柱的层塔板数能够满足要求，但是其不对称性常超出合格范围或靠近合格范围的上限。主要原因是装填过程中喷胶口或接近喷胶口的位置，会出现喷胶速率不一致的情况，导致层析柱局部填料不均一。采用该方法进行装填时常需要反复装填，才能得到符合要求的层析分离柱，大大降低工作效率。除此之外，装填自动停止后，有时会出现阀门关闭时间过长的警报，难以确认此时上阀是否关闭，存在填料泄漏和污染风险。

为解决现有技术的不足，本发明提供一种装填自动喷胶层析柱的方法，通过在胶面达到喷胶层析柱上筛板之前，即在胶面离上筛板一定距离时，手动停止装柱，使得装柱效果好，装柱频次减少，同时节约操作时间。

发明内容

本发明提供一种装填自动喷胶层析柱的方法，其特征在于，所述的方法通过在胶面离上筛板一定距离时，手动停止装柱。

在一些具体的实施例中，所述的方法包括但不限于以下步骤：

1)下连接口用硅胶管连接至排废口，关闭上阀，调节自动装柱器的泵压力；

2)打开上阀，开启下连接口，调节自动装柱器的泵压力，将填料通过上阀和喷胶口泵入层析柱，注射用水从下连接口排出，实现填料置换柱内注射用水；

3)观察胶面，当胶面离上筛板一定距离时，立即关闭上阀，迅速调节自动装柱器的泵压力至0bar；

4)关闭下连接口。

在一些具体的实施例中，所述1-4各步骤是依次进行的。

在一些具体的实施例中，所述的方法适用于本领域所有的自动喷胶层析柱，优选适用于ISO PAK型号的层析柱，例如Merck生产的ISO PAK型号层析柱。