[发明专利]T7RNA聚合酶突变体、mRNA、基因、表达载体及细胞有效
| 申请号： | 202010412721.9 | 申请日： | 2020-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN112921014B | 公开（公告）日： | 2023-01-06 |
| 发明（设计）人： | 左炽健;刘楠 | 申请（专利权）人： | 左炽健 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N15/85;C12N1/21;C12N5/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 苏州三英知识产权代理有限公司 32412 | 代理人： | 朱如松 |
| 地址： | 215000 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | t7rna 聚合 突变体 mrna 基因 表达 载体 细胞 | ||
1.T7RNA聚合酶突变体，其特征在于，该突变体是如SEQ ID No:1所示的野生型T7 RNA聚合酶通过突变氨基酸突变所得的突变体，所述突变氨基酸为Y639T、M635V、R632Q、K631L、Y571T、R627E、K472S的组合。
2.基因，其特征在于，该基因编码权利要求1所述的T7RNA聚合酶突变体，该基因是在编码如SEQ ID No:1所示的野生型T7 RNA聚合酶氨基酸序列的DNA序列基础上，通过突变根据权利要求1所述的突变氨基酸组合所相应的DNA密码子序列所得到的。
3.基因表达载体，其特征在于，载体为将运载体插入权利要求2所述的基因从而表达权利要求1所述的T7 RNA聚合酶突变体。
4.根据权利要求3所述的基因表达载体，其特征在于，所述运载体包括pET21a(+)或pET28a(+)或pET30(+)。
5.细胞，其特征在于，所述细胞能够根据权利要求2所述的基因从而表达权利要求1所述的T7 RNA聚合酶突变体。
6.根据权利要求5所述的细胞，其特征在于，所述细胞为将权利要求3-4任一所述的基因表达载体转染到感受态细胞得到。
7.根据权利要求6所述的细胞，其特征在于，所述感受态细胞包括DH5-alpha感受态细胞或TOP10感受态细胞或BL21感受态细胞或Hela细胞。
8.根据权利要求5-7任一所述的细胞，其特征在于，所述细胞其表达温度为16-30℃。
9.根据权利要求5-7任一所述的细胞，其特征在于，所述细胞其表达为在0.2-1mM浓度的IPTG环境下进行。
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