[发明专利]一种防控梨叶片异常脱落的方法

权利要求书

1.赤霉素在防控梨叶片异常脱落中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，对梨树枝条外源喷施赤霉素溶液。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述赤霉素溶液的浓度为0.5～1.0mg/L；优选为1.0mg/L。

4.一种防控梨叶片异常脱落的方法，其特征在于，对梨树枝条外源喷施赤霉素溶液。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述赤霉素溶液的浓度为0.5～1.0mg/L；优选为1.0mg/L。

6.一种筛选防控梨叶片异常脱落的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)测定梨叶柄离区中的赤霉素含量：取梨叶柄离区，液氮速冻，放置于-80℃超低温冰箱保存，用于测定叶柄离区中的赤霉素含量；

(2)外源喷施赤霉素与其他植物生长调节剂，观察赤霉素与其他植物生长调节剂对梨落叶情况的影响；

(3)外源喷施不同浓度赤霉素处理，测定叶柄离区的生理变化，确定最佳赤霉素处理浓度。

7.根据权利要求1所述的筛选防控梨叶片异常脱落的方法，其特征在于，步骤(1)中测定叶柄离区中的赤霉素含量的过程为：

选材：在采样地点的正常生长区与早期落叶严重区随机挑选3株果树，每株果树选取3支带有叶片的果枝整枝采下放于采集样品袋中，为了消除生理影响，选择生长相似的枝条带回实验室进行仔细彻底的清洗；

取样：使用洁净的刀片从枝条样本中手工解剖叶柄离区组织，其中包含离区细胞及邻近的细胞，置于液氮中，保存于-80℃冰箱；

测定：50mg的叶柄离区样品在液氮中研磨成粉末后，同时加入0.5mL体积比为80:20的甲醇/水提取液并在4℃下避光提取12h，10,000g，20min，4℃离心后，收集上清液，将所得到的粗提液经过HiCapt-C18/SAX固相萃取柱串联的装置，以除去色素和酯类杂质，HiCapt-C18/SAX串联的固相萃取小柱需先预处理，清洗与活化；上样后，取下上端的HiCapt-C18固相萃取柱，采用2mL体积比为80:20的甲醇/水对SAX萃取小柱进行清洗，再用3mL体积比为99:1的乙腈/甲酸对SAX萃取小柱上保留的目标酸性植物激素进行解吸；解吸液在40℃下恒定氮气流吹干，并用100μL水重新溶解；在所得到的100μL溶液中加入10μL甲酸，使得酸性植物激素呈分子状态；然后用乙醚进行萃取；将2次萃取的有机相进行合并后在室温下氮气吹干，并重新溶解于100μL乙腈中；在所得到的乙腈溶液中加入10μL×20μmol/mL三乙胺和10μL×20μmol/mL 3-溴代丙烯酰基三甲基溴化铵，在室温下涡旋35min后氮气吹干，然后用200μL体积比为90：10的水/乙腈重新溶解，以供随后的UPLC-MS/MS分析。

8.根据权利要求1所述的防控梨早期落叶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述赤霉素与其他植物生长调节剂的处理浓度为：赤霉素0.5mg/L和1.0mg/L；乙烯利0.04％和0.08％；脱落酸0.3mg/L和1.0mg/L；生长素0.3mg/L和0.6mg/L，以清水为对照。

9.根据权利要求1所述的筛选防控梨叶片异常脱落的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的处理方法为选取长势一致、同一品种的梨树做好标记，喷施时选择晴天上午，将植物生长调节剂在叶片正面与反面以及与叶柄连接处喷洒均匀；各浓度的试剂重复三次，每6～8天喷施一次。处理前统计每个枝条的叶片数，以便之后进行叶片保留率的统计，每隔6～8天统计一次叶片数；叶片保留率＝目前叶片数/最初叶片总数。

10.根据权利要求1所述的筛选防控梨叶片异常脱落的方法，其特征在于，步骤(3)中喷施的赤霉素浓度为0.5mg/L和1.0mg/L，处理方法为选取生长势一致的健壮枝条，放置于含清水的烧杯中，每4h进行赤霉素处理，喷施清水为对照，共28h；处理完成后采集枝条叶柄离区置于-80℃保存，用于测定叶柄离区的生理变化，包括活性氧相关物质含量及抗氧化酶活的测定。