[发明专利]抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体制备方法和应用

说明书

本申请公开了一种抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体制备方法，包括以下步骤：将鸡滑液囊支原体菌株复苏后，增殖培养三代后，充分灭活，离心取沉淀，获得鸡滑液囊支原体抗原。将鸡滑液囊支原体抗原溶液与白油佐剂混合乳化，对每只母鸡进行基础免疫，注射0.5ml；在基础免疫后,进行两次加强免疫，免疫方法和剂量与基础免疫相同。第一次加强免疫后开始收集免疫鸡蛋，将获得的免疫鸡蛋用酒精消毒，破壳收集卵黄，纯化后获得特异性卵黄抗体。通过上述方法制备得到的抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体，能够有效预防和治疗鸡滑液囊支原体疾病。易于大规模生产，成本低廉，得到的产品是一种安全的抗鸡滑液囊支原体疾病的制剂。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体制备方法和应用。

背景技术

鸡滑液囊支原体疾病是一种由鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae，MS)引起的禽类的一种急性或慢性传染病。以关节渗出性的滑液囊膜炎及腱鞘滑膜炎为特征，由此得名滑液囊支原体。MS主要感染商品蛋鸡、肉鸡和种鸡，鸡只感染后会导致明显的跛行、生长发育迟缓及胴体降级。20世纪50年代美国首次报道了MS感染，随后在澳大利亚、亚洲、非洲、南美洲相继报导了该病的发生。MS感染还会引起家禽亚临床呼吸道症状、关节炎、滑膜炎、气囊炎、生殖道炎和鸡蛋尖端综合征，给全球肉鸡行业造成了巨大的经济损失。除了气囊炎和关节炎外，该病蛋壳尖畸形和滑膜感染引起的减蛋综合征在全世界范围内造成了巨大的经济损失。我国MS的感染和流行是从南方的黄羽肉鸡开始，经过检测发现是MS，后来蛋鸡和白羽肉鸡也相继出现MS感染。临床表现出腿病、呼吸道症状、死淘率高、生产性能降低、屠宰废弃率高。该病直接导致中国家禽养殖场养殖损失上百万只鸡，而且本病一旦与其他疾病发生继发感染会。引起更高的死淘率甚至难以防控的局面，流行病学调查显示近些年来该病的发病率呈逐渐上升趋势。

MS主要通过接触进行传播，而且一旦感染终身带菌，目前尚无有效的治疗手段，抗生素治疗可以显著降低MS的感染水平，挽回疾病带来的损失，但无法根除MS，一旦停药感染可能会立即加重，而过量用药不仅会使动物产生依赖性，还会增加MS的耐药性并造成药物残留问题，所以药物治疗在生产上的使用越来越受到限制。预防接种是控制支原体感染的一个长期解决方案，遗憾的是目前只有澳大利亚有经突变选育的一种弱毒苗，该疫苗免疫效果已经得到研究证实，但由于该疫苗是活苗，与支原体清除计划产生冲突，在很多国家被禁用，国内尚无商品化的支原体疫苗上市。近年来卵黄抗体(lgY)作为抗生素的替代品，由于其无残留、无毒副作用、绿色安全的特点引起了人们的广泛关注。卵黄抗体是鸡被外来抗原刺激后，所产生的特异性抗体聚集在卵黄内，通过相应技术对卵黄抗体进行提取，制成卵黄抗体制剂。家禽免疫系统的特性决定小剂量的抗原便可发挥作用，因此可以用少量抗原在较长时间获得大量高滴度特异性抗体。一个母鸡每年大约能产280枚鸡蛋，每个卵黄里面含有100～150mg IgY，因此每只鸡每年能够产生40g特异性卵黄抗体，具有很大的生产潜力。因此，与其他哺乳动物制备多克隆抗体相比，特异性IgY制备有着经济、易操作、产量大等优点。

随着研究的深入，国内外学者发现利用卵黄抗体可以预防和治疗畜禽的各种疾病，如IBD、ND以及鸭病毒性肝炎等，而且取得了良好的效果。所以应用卵黄抗体替代抗生素治疗MS疾病是切实可行的，因此研制抗MS的特异性卵黄抗体，对于鸡滑液囊支原体疾病的防治具有重要意义。

发明内容

本申请的目的之一在于提供一种抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体制备方法；

本申请的目的之二在于提供一种由上述制备方法制备得到的抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体；

本申请的目的之三在于提供一种利用上述抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体的应用。

本申请的目的是通过以下技术方案实现的：

一种抗鸡滑液囊支原体疾病的特异性卵黄抗体制备方法，包括以下步骤：