[发明专利]一种含有单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种含有单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物及其制备方法和应用，属于抗肿瘤糖疫苗研制技术领域。本发明提供的一种含有单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物，所述单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物为通式为(Ⅰ)的化合物或其可药用盐。单磷酸化的脂质A能提高Tn糖抗原的免疫原性，将Tn糖抗原提呈到相应的免疫细胞，产生具有更高滴度的针对肿瘤糖抗原Tn特异性的免疫反应，因此该缀合物，作为全合成的糖抗原疫苗，有望成为新一代的抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及一种含有单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物及其制备方法和应用，属于抗肿瘤糖疫苗研制技术领域。

背景技术

肿瘤疫苗在癌症防治上具有较好的临床应用前景，以肿瘤细胞表面异常表达的肿瘤相关糖抗原(TACAs)为靶点的肿瘤糖疫苗具有特异性高、副作用小、疗效较好等优点。其中Thomsennouveau(Tn)抗原在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等恶性肿瘤细胞表面均异常过量表达，是糖抗原肿瘤疫苗设计的优秀靶点。

糖抗原本身的免疫原性较差，它们需要与具有免疫活性的载体分子共价结合才能发挥作用，最成熟和常用的载体是蛋白质。常用的蛋白质载体有KLH、BSA、DT、CRM197和TT，这些合成的糖蛋白疫苗存在着以下不足：偶联位点不确定、偶联率不稳定、组成成分复杂、以及蛋白质引起的“表位抑制”效应。

为了避免这些缺点，引入内嵌佐剂的全合成糖抗原疫苗成为新的研究策略。全合成的糖脂疫苗能除去不必要的免疫原性成分，仅包含那些引发有效免疫反应的必需元素。通常，将脂质佐剂(例如基于脂肽或基于脂氨基酸的TLR配体)掺入疫苗构建体中，并称为内源性佐剂，如各种亚型TLR(Toll-like receptor)的激动剂以及能激发iNKT免疫细胞的KRN7000激动剂等。

细菌脂多糖(Lipidpolysacchrides，LPS)是细菌外膜的表面糖脂。LPS疏水部分的Lipid A是Toll样受体4(TLR4)的配体，Lipid A可作为佐剂，通过启动强烈的Th1反应产生抗癌作用。但由于毒性大，Lipid A不能应用于临床。研究者发现去掉Lipid A结构中1位磷酸(其反应式如下式所示)得到的MPLA(Monophosphoryl lipid A)，依然能靶向地与TLR4结合，毒性明显降低且活性变化不明显，

MPLA作为临床试验的佐剂用于许多不同类型的癌症，如IV期黑素瘤、卵巢癌、肺癌、血小板减少症、白血病、肉瘤、merkel细胞癌和非霍奇金淋巴瘤。OM-174，一种二酰化脂质A类似物，已经在患有难治性实体瘤的患者中进行了临床试验，显示出良好的耐受性。

GUO课题组对MPLA作为全合成肿瘤疫苗内嵌佐剂做了大量的研究，主要是通过将MPLA与多种糖抗原结合来制备抗菌和抗肿瘤糖缀合物疫苗，如GM3-MPLA，MPLA-sTn，GM2-MPLA等糖抗原疫苗的免疫学研究表明糖抗原疫苗主要诱导IgG抗体的产生，该缀合物疫苗在没有外部佐剂的辅助作用下依然引发强烈的免疫应答，表明它的自我辅助属性(Chemical Biology,2012,7:235；Scientific reports,2017,7:11403；BiomolecularChemistry,2014,12:3238)。尤其是Guo课题组合成了Globo H与优化的MPLA的缀合物MPLA-Globo H，在无外加佐剂的情况下，能更快速地产生比Globo H-KLH(佐剂为CFA)强约2倍的IgG抗体。因此，MPLA被证明是一种用于全合成糖缀合物癌症疫苗的全新设计强大的内嵌佐剂(Chemical Science,2015,6:7112.)。

本发明以磷酸化的脂质A(MPLA)作为内嵌佐剂缀合糖抗原Tn得到一种单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物，该缀合物作为疫苗，能有效预防和/或治疗多种癌症。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种含有单磷酸化的脂质A与糖抗原的缀合物。