[发明专利]一种用于肝胆疾病诊断的代谢标志物

说明书

本发明公开了一种用于肝胆疾病诊断的代谢标志物及其筛选方法，所述代谢标志物包括血清代谢标志物、尿液代谢标志物，所述血清代谢标志物包括EPA，AA，DHA，TCDA，DCA，GCA，TCA，GCDA，GCDCA，GDCA，CDCA，LPC16‑0，LPC18‑0，LPC18‑1，LPC20‑0中的单个或任意组合。所述筛选方法利用预先建立好的LC‑MS/MS方法，定量检测临床大样本(血清和尿液)中目标代谢物的含量，筛选诊断标志物。本发明的代谢标志物可以有效地诊断出肝胆疾病，降低肝癌和胆管癌漏检率，非常有利于肝癌和胆管癌的早诊早治，对于改善肝癌和胆管癌预后，降低肝癌和胆管癌的死亡率有很大帮助，具有良好的临床使用和推广价值。在实际应用中，可以按照本发明建模方法选取更多的样本和更多的代谢物组合进行建模，增加模型的准确度。

技术领域

本发明属于医药诊断领域，涉及一种用于肝胆疾病诊断的代谢标志物。

背景技术

肝脏是人体最重要的代谢器官，它不仅是人体内源性代谢物(氨基酸、糖类、脂类等)最重要的代谢场所，而且还是人生命周期中所暴露的上百万种外源性毒物最主要的解毒器官。许多因素(例如：高脂、高糖、酒精、化学毒物、肝炎病毒等)会导致健康的肝脏受损，进而发展成为肝炎、肝硬化和肝癌。随着肝病的进展，肝脏会出现不同的代谢表型，根据代谢表型的不同将肝脏的健康状态划分成了四个层级，0期(Phase 0)：健康肝(healthyliver)；1期(Phase 1)：非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)/非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)/酒精性肝病(alcoholicliver disease，ALD)/病毒性肝炎(viral hepatitis)；2期(Phase 2)：肝硬化(cirrhosis)；3期(Phase 3)：肝细胞型肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)/胆管细胞型肝癌(cholangiocarcinoma，CCA)。大量的研究表明，肝病进程中，肝脏的代谢会出现明显的变化，这种代谢表型变化主要包含两个方面，即：能量代谢重塑(脂肪酸的β-氧化、线粒体呼吸和胞质糖酵解)和核心代谢表型产生(血清溶血卵磷脂下降、血清和尿液胆汁酸含量上升)。

诊断标志物的筛选是一个富有挑战性的工作。代谢物(分子量小于1000的内源性小分子)作为生命活动最下游层级(基因→RNA→蛋白→代谢物)，是最接近生物表型的物质，由于信号传导的“级联放大”效应，基因层面的微小变化会导致代谢物表达水平的较大波动，因此代谢物作为诊断标志物具有灵敏度高的天然优势。但是，代谢物作为诊断标志物也有自身的缺陷，那就是特异性较差，因为代谢物的组织特异性不如蛋白的组织特异性高，因此不同的疾病可能会导致相同的代谢物变化。但是，溶血卵磷脂和胆汁酸的合成基本上都在肝细胞中进行，因此，肝脏的病变会直接影响这两类代谢物的表达水平，筛选这两类代谢物中的几个物质作为肝病进程的诊断标志物应该具备很好的灵敏度和特异性。