[发明专利]前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒，属于体外检测技术领域。该试剂盒包括：校准品、磁颗粒反应液R1、示踪结合物反应液R2和捕获抗体反应液R3；所述的磁颗粒反应液R1包含链酶亲和素磁珠、缓冲液和防腐剂；所述的示踪结合物反应液R2包含吖啶酯标记的p2PSA抗体或tPSA抗体、NaCl、缓冲液、防腐剂、阻断剂、蛋白稳定剂和表面活性剂；所述的捕获抗体反应液R3包含生物素标记的tPSA抗体或p2PSA抗体、NaCl、缓冲液、防腐剂、蛋白稳定剂和表面活性剂。本发明还提供一种所述试剂盒的制备方法。本发明的前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒检测灵敏度高、可靠性好，成本低，适合推广使用。

技术领域

本发明属于体外检测技术领域，具体涉及一种前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

前列腺癌是危害中老年男性健康的常见恶性肿瘤，血清前列腺特异性抗原(prostate–specific antigen，PSA)检测联合直肠指检是较早期发现前列腺癌的初筛方法，对于筛查可疑的病例可进行前列腺穿刺活检以助诊断。但当患者总PSA(total PSA，tPSA)在4.0～10.0μg/L，即传统观点的灰区时，难以用PSA进行明确的鉴别诊断。虽然可同时进行游离PSA(free PSA，fPSA)检测并计算fPSA与tPSA的比值(f/tPSA)加以鉴别，但收效并不明显。

血清前列腺特异性抗原同源异构体2(isoform[-2]proprostate-specificantigen，p2PSA)是PSA前体的一种同源异构体，具有不被水解的稳定性、肿瘤特异性、组织区域特异性的特点，目前越来越多的研究表明：与传统的PSA等相比，检测及经计算得到的百分p2PSA(％，p2PSA)和前列腺健康指数(prostate health index,PHI)能显著提高前列腺癌(Prostate cancer,PCa)的诊断特异性，减少不必要的前列腺穿刺活检，并且在肿瘤恶性度预测及低风险、局限性的PCa患者的主动监测中均显示出良好的应用价值。

定量检测血清中的前列腺特异性抗原同源异构体(p2PSA)，对前列腺癌的诊断起辅助作用。在国内，血清前列腺特异性抗原同源异构体(p2PSA)检测临床主要以国外贝克曼公司试剂应用为主，国外进口试剂价格非常昂贵，给患者带来很大的经济负担，不利于在基层普及。因此，有待开发一种检测灵敏度高、可靠性好的血清前列腺特异性抗原同源异构体检测试剂盒，以降低患者使用成本，并提高推广使用。

发明内容

本发明要解决现有技术中的技术问题，提供一种检测灵敏度高、可靠性好的前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，以降低患者使用成本，并提高推广使用。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案具体如下：

本发明提供一种前列腺特异性抗原同源异构体化学发光免疫检测试剂盒，包括：校准品、磁颗粒反应液R1、示踪结合物反应液R2和捕获抗体反应液R3；

所述的磁颗粒反应液R1包含链酶亲和素磁珠、缓冲液和防腐剂；

所述的示踪结合物反应液R2包含吖啶酯标记的p2PSA抗体或吖啶酯标记的tPSA抗体、NaCl、缓冲液、防腐剂、阻断剂、蛋白稳定剂和表面活性剂；

所述的捕获抗体反应液R3包含生物素标记的tPSA抗体或生物素标记的p2PSA抗体、NaCl、缓冲液、防腐剂、蛋白稳定剂和表面活性剂。

在上述技术方案中，所述的磁颗粒反应液R1中链酶亲和素磁珠的质量浓度为0.03％-0.1％；所述的示踪结合物反应液R2中吖啶酯标记的p2PSA抗体或吖啶酯标记的tPSA抗体的浓度为0.1-3μg/mL；所述的捕获抗体反应液R3中生物素标记的tPSA抗体或生物素标记的p2PSA抗体的浓度为0.5-8μg/mL。