[发明专利]一种幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法，涉及化学发光体外诊断技术领域。解决现有幽门螺旋杆菌检测方法存在测试耗时长，重复性差，稳定性差，灵敏度差，准确度差的技术问题。本发明试剂盒，包括：链霉亲和素磁微粒溶液、化学发光物质标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液、生物素标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液、校准品、质控品。本发明还提供幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法。本发明的试剂盒采用均相的磁微粒发光技术和夹心法直接检测血清中幽门螺旋杆菌浓度，具有测试速度快，测试结果重复性好，试剂性能稳定，灵敏度高，测试结果准确等优点。

技术领域

本发明涉及化学发光体外诊断技术领域，具体涉及一种幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

幽门螺旋杆菌(Helicobacrer pylori，HP)是一种寄生在胃部和十二指肠的革兰式阴性微量需氧细菌，其感染非常普遍，全球自然人群感染超过50％。几乎所有的幽门螺旋杆菌感染者在组织学上均存在慢性活动性炎性反应，最新的专家共识将HP胃炎明确为“一种感染(传染)性疾病”，但其中约70％以上感染者无症状，其他可导致慢性胃炎、消化性溃疡等。研究表明幽门螺旋杆菌是胃炎、消化性溃疡的主要致病因素，并且与功能性消化不良、胃粘膜相关性淋巴组织(MALT)淋巴瘤、胃癌的发生密切相关、世界卫生组织国际癌症研究机构已将其纳入一类致癌因子。有关幽门螺旋杆菌感染的国际指南中指出，根除幽门螺旋杆菌可显著减少胃和十二指肠疾病包括胃癌的发病率，并可在未来减少幽门螺旋杆菌感染的新发病例。

幽门螺旋杆菌的诊断方法依据取材有无创伤性分为两大类：侵入性检测方法和非侵入性检测方法。前者是指依赖胃镜取材的检测方法，包括组织学检测(如HE染色、Warthin-Starry银染、改良Giemsa染色、甲苯胺蓝染色等)、细菌培养和快速尿素酶试验(RUT)等；后者则包括血清学(抗体)检测、粪便抗原检测和尿素呼气试验(UBT)等。不同的诊断方法有各自的优势和局限性。

目前市场上应用的幽门螺旋杆菌检测方法主要是酶联免疫吸附法。酶联免疫吸附法包括：酶标板，酶标板包括固相载体和包被层，其特征在于：所述的固相载体上设置多个微孔，包被层附着在固相载体的微孔表面，包被层是由幽门螺旋杆菌抗体和牛血清白蛋白依次涂布在固相载体的微孔表面形成的复合层，通常采用TMB为显色底物。反应过程中，待测物与生物素化的幽门螺旋杆菌抗体结合在酶标板上，再通过亲和素化辣根过氧化物酶(HRP)放大信息，以3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(TMB)及硫酸分别作为底物及终止液，完成检测。这种方法的缺点是：(1)以酶标板作为固相载体时，由于载体表面的检测物与样品中的待测物无法充分接触，导致反应效率较低，反应时间较长，通常在60min以上，有些甚至达到3小时以上。(2)由于酶的生物活性会随着环境条件(温度、pH等)发生变化，导致同样数量的酶在不同条件下产生的光量有明显的区别，无法得到稳定的结果。

发明内容

本发明要解决现有幽门螺旋杆菌检测方法存在测试耗时长，重复性差，稳定性差，灵敏度差，准确度差的技术问题，提供一种高效率、高稳定性的幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案具体如下：

本发明提供一种幽门螺旋杆菌磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：R1试剂、R2试剂、R3试剂、校准品、质控品；

所述R1试剂为链霉亲和素磁微粒溶液；

所述R2试剂为化学发光物质标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液；

所述R3试剂为生物素标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液。

在上述技术方案中，优选的是，所述链霉亲和素磁微粒溶液浓度≥0.03％，所述生物素标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液浓度≥0.1μg/mL，所述化学发光物质标记的幽门螺旋杆菌抗体溶液浓度≥0.1μg/mL。