[发明专利]一种基于检测试纸显示的核酸检测方法及核酸检测试剂盒有效
申请号: | 202010424727.8 | 申请日: | 2020-05-19 |
公开(公告)号: | CN111647642B | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
发明(设计)人: | 吴松;王熵;李宇清;雷崎方 | 申请(专利权)人: | 深圳市众循精准医学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6804 | 分类号: | C12Q1/6804 |
代理公司: | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人: | 徐凯凯 |
地址: | 518000 广东省深圳市罗*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 检测 试纸 显示 核酸 方法 试剂盒 | ||
1.一种基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,包括步骤:
提供一种核酸探针,所述核酸探针一端通过共价键与固相颗粒连接,所述核酸探针另一端通过共价连接着抗体识别物;
将待测样品进行扩增,将扩增后的待测样品以及所述核酸探针加入由crRNA、以及Cas蛋白组成的反应体系中,反应得到反应液;
将所述反应液滴加在检测试纸的加样区,所述加样区含有胶体金标记的第一抗体,所述检测试纸包括与所述第一抗体特异性结合的第二抗体位点,以及与所述抗体识别物结合的链霉亲和素位点;
通过观察所述检测试纸的显色条带判断所述待测样品中是否含有靶标核酸。
2.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,
当所述核酸探针为DNA探针时,所述Cas蛋白为Cas12蛋白。
3.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,当所述核酸探针为RNA探针时,所述Cas蛋白为Cas13蛋白。
4.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,所述固相颗粒为磁珠、玻璃珠,塑料珠或琼脂糖珠中的一种。
5.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,所述抗体识别物为生物素分子、FAM和FITC中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,所述待测样品为拭子、血液、分泌物、环境采集物或痰液中的一种。
7.根据权利要求1所述基于检测试纸显色的核酸检测方法,其特征在于,所述通过观察所述检测试纸的显色条带判断所述待测样品中是否含有靶标核酸的步骤包括:
若观察到所述检测试纸上出现两条显色条带,则判定所述待测样品中含有靶标核酸;
若观察到所述检测试纸上仅第二抗体位点出现显色条带,则判定所述待测样品中不含有靶标核酸。
8.一种基于检测试纸显示的核酸检测试剂盒,其特征在于,包括核酸探针,由crRNA以及Cas蛋白组成的反应体系,以及检测试纸;所述核酸探针一端通过共价键与固相颗粒连接,所述核酸探针另一端通过共价连接着抗体识别物;所述检测试纸的加样区含有胶体金标记的第一抗体,所述检测试纸还包括与所述第一抗体特异性结合的第二抗体位点,以及与所述抗体识别物结合的链霉亲和素位点。
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