[发明专利]lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用

说明书

本发明公开了lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用。lncRNA有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNA表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，其中的lncRNA表达量也会变化，本发明首次公开了lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物，利用临床上比较容易直接获得的全血标本，结合设计的引物对进行qRT‑PCR验证lncRNA的差异表达，具有快速、简单、省时、检测灵敏度高，样品消耗少的优点，是非常适合的利用差异表达的lncRNA诊断新生儿肠外营养相关性肝病的方法；尤其是，本发明通过平行实验验证了lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的准确性以及特异性。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性lncRNA的方法。

背景技术

肠外营养(parenteral nutrition, PN)对不能通过正常肠道方式来满足生长的新生儿带来了革命性关爱。 美国自60 年代首次报道长期 PN应用于一例新生女婴，至今已有数十万患者依赖 PN得以生存。但长时间(＞2 周) PN应用也存在许多相关问题, 肠外营养相关性肝病 (total parenteral nutrition-associated liverdisease, PNALD) 是一种最常见的并发症，随着长时间PN的应用，PNALD 发生率增加，主要表现为肝脂肪变性、胆汁淤积和转氨酶升高。约有 30％-60％的患儿因长期 PN 发生 PNALD，伴有肝功能异常和肝细胞损害，严重者发展为肝硬化危及生命。而新生儿发生 PNALD 更早、肝功能下降更快，死亡率高达38%～51%。因此，PNALD 是严重威胁新生儿健康的重大疾病，如何防治该病是新生儿临床焏待解决的问题。PNALD临床主要表现为黄疸、肝脾肿大，可有白陶土样大便，肝功等化验检查多提示丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、碱性磷酸酶、血总胆红素、直接胆红素升高。

lncRNA是一类转录本长度大于200bp的非编码RNA产物，在转录、转录后和染色体修饰等多个层面，调控胚胎发育、细胞增殖、转移和分化等各种生命活动，其异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。lncRNA有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNA表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，其中的lncRNA表达量也会变化，lncRNA可从染色质重塑、转录调控及转录后加工等多种层面实现对基因表达的调控。lncRNA启动子同样可以结合转录因子，如Oct3/4、Nanog、CREB、Sp1、c-myc、Sox2与p53，局部染色质组蛋白同样具有特征性的修饰方式与结构特征，序列上保守性较低，只有约12%的lncRNA可在人类之外的其它生物中找到，其作用机制非常复杂，至今尚未完全清楚，比如已有许多研究证实了miRNAs参与调节TGFβ表达量和EMT过程，但参与此过程的lncRNA并不清楚。另外，一些在线网站比如starBase 2.0网站预测准确率低，比如现在已经比较明确的GAS5和miRNA21都预测不到，而且人血清中存在多达1400个lncRNA，还有变化，导致lncRNA无法有效利用，因此针对新生儿肠外营养相关性肝病，研发合适的特异性lncRNA作为标志物在调控基因转录、作为疾病诊断标志物等方面具有重要的研究和临床意义。

发明内容

本发明提供一种作为针对新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的lncRNA及其应用。本发明首次公开了lncRNA RP11-372K14.2作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物，利用临床上比较容易直接获得的全血标本，结合设计的引物对进行qRT-PCR验证lncRNA的差异表达，具有快速、简单、省时、检测灵敏度高，样品消耗少的优点，是一种准确特异诊断新生儿肠外营养相关性肝病的方法。

本发明的技术方案如下：

lncRNA作为新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物的应用；所述lncRNA为lncRNARP11-372K14.2。

lncRNA在制备新生儿肠外营养相关性肝病特异性标志物中的应用；所述lncRNA为lncRNA RP11-372K14.2。